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目的:通过观察三七花总皂苷对自发性高血压大鼠血压和心率的影响、对大鼠离体心脏灌流的影响、主动脉血管平滑肌细胞Ca2+调控作用及相关因素的影响,探讨三七花总皂苷防治高血压病作用及Ca2+调控相关机制。
方法:(1)以自发性高血压大鼠为研究对象,应用ACL-NIBP系统记录三七花总皂苷给药前后血压及心率的变化。(2)制作大鼠离体心脏,应用Powerlab系统,观察三七花总皂苷对离体心脏血流动力学、心率的影响。(3)以主动脉血管平滑肌细胞为研究对象观察不同剂量三七花总皂苷的作用。分别应用Western-blot技术检测RYR2蛋白半定量表达;RT-PCR技术分析RYR2,NCX1,Ca2+-ATPase mRNA表达。(4)运用激光工聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度。
结果:(1)三七花总皂苷对自发性高血压大鼠收缩压、舒张压在一定剂量均有降低作用,对心率影响小。(2)三七花总皂苷对离体心脏心率、收缩压、舒张压、-dp/dt、+dp/dt绝对值影响不明显,但降低趋势存在。在实验前后各组比值方面,三七花总皂苷对心率、收缩压、舒张压、-dp/dt和+dp/dt均能降低,三七花总皂苷大剂量组尤为明显。(3)三七花总皂苷能降低RYR2,NCX1 mRNA表达,RYR2蛋白表达。三七花总皂苷能增强Ca2+-ATPase活性,上调Ca2+-ATPase mRNA表达。(4)三七花总皂苷能降低VSMC内钙离子浓度,能降低Ryanodine、KB-R7943、Thapsigargin刺激引起细胞内钙浓度升高,能协同Ruthenium、Ochratoxin A、E-4031降低VSMC内钙离子浓度。
结论:三七花总皂苷能有效影响自发性高血压大鼠血压,直接舒张血管平滑肌,这一作用可能与影响血管平滑肌细胞Ca2+调控有关。三七花总皂苷防治高血压病的Ca2+调控机制可能在于通过多种途径影响细胞膜多种离子通道Ca2+内流和细胞内钙释放系统发挥Ca2+调控作用,从而降低细胞内钙离子水平,血管平滑肌舒张而发挥防治高血压病的作用。