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稀莶草(Herba Siegesbeckiae)为菊科稀莶属植物全草,《中国药典》2010年版收载菊科植物稀莶(Siegesbeckia orientalis L.)、腺梗豨莶(Siegesbeckia pubescensM.)和毛梗稀莶(Siegesbeckia glabrescens M.)3种植物的地上部位作为中药稀莶草。广泛应用于治疗类风湿性关节炎,临床疗效显著。本文以腺梗稀莶为研究对象,对其化学成分、体外活性、质量控制方法等进行了初步研究。具体研究内容如下：采用常压硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、常压ODS柱色谱等多种分离纯化技术,从腺梗豨莶提取物中分离得到了13个化合物,通过1H-NMR、13C-NMR、HMBC、MS等数据鉴定了其中的11个化合物。在这11个化合物中包括贝壳杉型二萜4个、海松烯型二萜3个、黄酮类2个、甾醇类1个、有机酸类1个,分别为对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17,18-三羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、奇任醇、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-17,19-二羧酸、豨莶精醇、HythiemosideB、鼠李素、对映-16a氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸、β-谷甾醇、3’,4’-二甲氧基槲皮素、富马酸。其中鼠李素、对映-16a氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸、3’,4’-二甲氧基槲皮素为首次从该属植物中分离得到的已知化合物。采用高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(HPLC-ESI/TOF-MS)对腺梗稀莶提取液中的化学成份进行了定性分析,并首次总结了贝壳杉型二萜的质谱裂解规律。以各色谱峰的保留时间、一级和二级质谱信息为依据,共准确鉴定了其中的8个成分,分别为奇任醇、Hythiemoside B、对映-16β,17,18-三羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16a氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸、鼠李素、3’,4‘-二甲氧基槲皮素。以一级、二级质谱信息为依据,经文献检索,推测出腺梗稀莶提取液中可能含有4个贝壳杉型二萜类化合物,1个贝壳杉型二萜苷类化合物,2个海松烯型二萜苷类化合物,3个黄酮类化合物,22个脂肪酸类化合物。以小鼠单核巨噬细胞RAW264.7为实验细胞株,分别考察了腺梗稀莶经大孔吸附树脂分离得到的五个部分提取物(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)和5个单体化合物对脂多糖诱导的巨噬细胞释放NO的抑制作用。实验结果表明提取物Ⅲ、Ⅳ、V对RAW264.7细胞NO的释放具有较强的抑制作用,抑制率在62%以上。提取物Ⅰ、Ⅱ对RAW264.7细胞释放NO的抑制作用较弱。5种单体化合物对RAW264.7细胞释放NO的抑制作用均较强,抑制率在62%以上,且高于阳性对照药奇任醇。采用三种通用型检测器(质谱检测器、示差折光检测器和蒸发光散射检测器),以十八烷基硅烷键和硅胶为固定相,建立了稀莶草中多组分的含量测定方法。①采用HPLC-ESI/TOF-MS负离子模式对稀莶草中奇任醇、Hythiemoside B、对映-16β,17,18-三羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16a氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸、鼠李素和3’,4’-二甲氧基槲皮素8种成分进行了含量测定,分别选择m/z 373.21、m/z 561.28、m/z 351.21、m/z 335.22、m/z 335.22、m/z 333.21、m/z 315.05、m/z 329.06离子进行定量分析。日内日间精密度RSD≤3.7%,回收率在97.4-101.2%范围内,定量限0.20-16 ng,8种化合物的线性关系均良好。应用此方法测定了5个不同产地及批次的稀莶草中8种化合物的含量。②使用RID检测器,在两种HPLC条件下,测定了8种成分含量。色谱条件Ⅰ：流动相为0.3%甲酸水-乙腈(72：28),测定了稀莶草中奇任醇、Hythiemoside B、对映-16β,17,18-三羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸的含量。色谱条件Ⅱ：流动相为0.3%甲酸水-乙腈(42：55),测定了稀莶精醇、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16a氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸和鼠李素的含量。建立的两种含量测定方法线性关系良好,重复性RSD≤4.0%,回收率在97.4-100.7%范围内。并应用此方法测定了2个不同产地腺梗稀莶中8种化合物的含量。③采用HPLC-ELSD法测定腺梗稀莶药材中奇任醇、Hythiemoside B、稀莶精醇、对映-16β,17,18-三羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16a氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸、3’,4’-二甲氧基槲皮素8种成分的含量。流动相组成为A：0.3%甲酸-水,B：乙腈,梯度洗脱。方法线性关系良好,重复性RSD≤3.9%,回收率在97.8-101.0%范围内。应用此方法测定了2个不同产地腺梗稀莶中8种化合物的含量。结果表明,HPLC-ESI/TOF-MS法灵敏度高专属性强,适合中药复杂体系的定性定量分析；HPLC-RID法不能使用梯度洗脱,适用于单组分分析或极性相差不大的多组分分析；HPLC-ELSD可以使用梯度洗脱,且灵敏度比HPLC-RID高1-2个数量级。适合中药中无紫外吸收的多组分的含量测定。本文综合运用了多学科的专业知识和多种分析方法,研究了腺梗稀莶药材中的化学成分,考察了腺梗稀莶药材五部分提取物及五个单体化合物体外抗炎活性,采用三种不同类型通用型检测器对稀莶草中多组分进行了含量测定,为腺梗稀莶抗类风湿性关节炎的药效物质基础的阐明、质量标准的完善和药材进一步的开发利用奠定了基础。