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目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人子宫内膜癌HEC-1B细胞凋亡及Survivin基因表达的影响,探讨其作用机制。
方法:采用四唑蓝快速比色法(MTT法)观察As2O3对人子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖的影响;应用流式细胞术(FCM)检测法观察细胞的周期及凋亡;采用免疫组织化学(Immunocytochemistry,ICC)、半定量逆转录—聚合酶链反应(reversetranscription—PCR,RT—PCR)检测As2O3作用HEC-1B细胞48小时后对survivin表达的影响。
结果:MTT显示As2O3可明显抑制HEC-1B细胞生长,并随着浓度的增加和作用时间的延长而增强(P<0.05);流式细胞术显示As2O3作用48小时后HEC-1B细胞中G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例上升(P<0.05);免疫细胞化学法和实时定量PCR结果显示As2O3作用48小时后,HEC-1B细胞中Survivin蛋白和基因表达明显下降(P<0.05)。
结论:(1)As2O3能明显抑制HEC-1B细胞的生长和增值,且作用随时间、剂量提高而增强;
(2)As2O3阻滞HEC-1B细胞周期于S期;
(3)As2O3具有显著的诱导细胞凋亡作用,随浓度提高而提高;FCM检测见典型的细胞凋亡峰;
(4)As2O3能下调Survivin的基因和蛋白表达。