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目的：研究M2型丙酮酸激酶(Tumor M2-PK, M2-PK)以及血管内皮样生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在人胃癌组织标本及体外培养的胃癌细胞株中的表达及其与肿瘤耐药性的关系,明确其是否可作为预测进展期胃癌患者的预后指标。方法：1、通过免疫组化法检测142例进展期胃癌患者手术标本中M2-PK和VEGF的表达水平,并分析两者之间表达相关性,以及两者与进展期胃癌患者病例特征、生存时间之间的关系。2、分别采用定量ELISA法和定量PCR法测定体外培养的普通胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823及耐药细胞株MGC-803中M2-PK,多药耐药蛋白(P-gp)和VEGF蛋白在蛋白质水平和核酸水平的表达情况。3、通过加入顺铂模拟临床治疗研究不同浓度的顺铂对SGC-7901、 BGC-823、MGC-803胃癌细胞株中M2-PK、P-gp和VEGF三种蛋白表达的影响。结果：1、142例进展期胃癌患者手术标本中M2-PK和VEGF阳性表达率分别为61.26%和65.49%,两者在进展期胃癌患者组织标本中的表达存在显著地相关性(r=0.718,p<0.01)。M2-PK和VEGF的表达与肿瘤大小(p=0.0001；p=0.0017),浸润深度(p=0.0024；p=0.0261)及淋巴结转移数量(p=0.036；p=0.028)之间存在有显著相关性。低表达M2-PK和VEGF的进展期胃癌患者的五年生存率分别为48.90±18.14月、51.28±17.16月,高分别为表达M2-PK和VEGF的进展期胃癌患者的五年生存率24.55±19.63月、35.29±19.84月。2、ELISA结果显示：1)SGC-7901、BGC-823、MGC-803三种胃癌细胞株中,M2-PK蛋白的含量均在0-40IU/m1之间；2)SGC-7901、BGC-823、MGC-803三种胃癌细胞株中均未检测到P-gp蛋白质。3)SGC-7901、BGC-823、MGC-803三种胃癌细胞株中,VEGF蛋白的含量均在400pg/ml间以内。3、从PCR检测结果可以看出对于SGC-7901, BGC-823胃癌细胞,随着顺铂加药浓度的增加,P-gp基因的表达水平相对恒定,M2-PK基因和VEGF基因的表达水平逐步下降。而在顺铂耐药的MGC-803细胞中,随着顺铂加药浓度的增加,P-gp基因和M2-PK基因的表达水平表现为逐步上升,而VEGF基因的表达水平却变化不大；三种胃癌细胞株中M2-PK基因和VEGF基因表达量均增强,该结果与第一部分中肿瘤组织中检测到了高表达M2-PK、VEGF是相符的。结论：1、低表达M2-PK和VEGF的进展期胃癌患者的五年生存率显著高于高表达M2-PK和VEGF的进展期胃癌患者患者,且M2-PK和VEGF在进展期胃癌患者组织标本中的表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移数量及TNM分期相关,是预测进展期胃癌预后的有效指标。2、P-gp基因是一种耐药性基因,M2-PK基因和VEGF基因在胃癌耐药细胞株中随着顺铂干预浓度增高其表达量随之升高,提示这两种基因在一定程度上可以反映出胃癌细胞的耐药性。3、本研究为将来在胃癌的诊断、治疗和预后评价积累了数据,并摸索了研究方法,也为之后的胃癌多药耐药性的临床研究提供了一定的依据。