耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学分型及同源性分析

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目的:研究安徽省不同地区的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病学特征及P-V杀白细胞素(Panton-Valetine leukocidin,PVL)分布情况,了解MRSA的同源性状况,对MRSA的分子流行病学分型方法进行评价,分析MRSA基因型分布与抗生素应用的关系,以指导临床用药及控制MRSA引起的感染,为临床对MRSA的防治提供依据。  方法:收集2006年至2008年安徽三家医院分离的非重复MRSA91株,用Vitek-32微生物分析仪检测MRSA的耐药性并分析其耐药模式;应用PCR技术进行PVL基因检测;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、随机引物扩增多态性(RAPD)技术以及多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)联合葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型方法对其作分子流行病学分型和同源性分析。  结果:所有MRSA菌株对万古霉素、奎努普丁/达福普丁、利奈唑胺100%敏感;对其他抗菌药物有不同程度耐药。主要耐药模式为同时对红霉素、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢唑林、克林霉素5种药物耐药。MRSA菌株的SCCmec分型以II型、III型为主,MLST分型共有13种ST型,其中ST239-MRSA-III型菌株(占43.55%)和ST5-MRSA-II(占30.65%)为优势克隆,另有两种型别为新型,经MLST官方网站确认后分别命名为ST1226和ST1296。RAPD分析分为7个主要型别,其中I型为优势型别;PFGE共有26个型别,36个亚型,主要PFGE型为A、B、R、I型等。  结论:三家医院MRSA分型及主要流行株存在差异,本省主要流行克隆为ST239-MRSA-III型菌株(Brazilian/Hungarian株)和 ST5-MRSA-II型菌株(NewYork/Japan株),PFGE分型结果显示ST5-MRSA-II型菌株(NewYork/Japan株)高度同源,而三家医院的ST239-MRSA-III型菌株(Brazilian/Hungarian株) PFGE分型同源性不高。MLST联合SCCmec、PFGE及RAPD分型方法均可很好地用于MRSA分子流行病学分析,MLST联合SCCmec和PFGE分型结果之间相关性较好。省立医院MRSA临床株与ICU监测株具有同源性,呈暴发流行。
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