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前言 在高血糖的条件下,许多生物大分子会发生非酶糖基化反应,产生糖基化终产物(Advanced Glycation End Products,AGEs),大量蓄积于体内并沉积于血管壁。近年大量研究证明,糖基化终产物在糖尿病性动脉粥样硬化的发病中起重要作用。基质金属蛋白酶参与动脉粥样硬化病变的进展,尤其是与斑块破裂导致的临床事件有密切关系。然而,糖基化终产物与基质金属蛋白酶的相关研究较少。 本实验旨在通过观察糖基化终产物作用后的巨噬细胞的形态变化并测定MMP-9活性、表达改变,来研究糖基化终末产物对巨噬细胞活化及其与斑块破裂的关系;并根据他汀类药物的可阻断类异戊二烯途径的特性,结合类异戊二烯中间产物的逆转效应的观察,用以确证类异戊二烯通路是否参与了AGE对巨噬细胞基质金属蛋白酶的诱导过程。 方法 体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,分别以不同浓度BSA-AGE(0、50、100、200、400mg/L)作用48h;以相同浓度BSA-AGE(400mg/L)作用不同时间(0、12、24、36、48h);在BSA—AGE(400mg/L)培养条件下,不同浓度的辛伐他汀(5μmol/L,50μmol/L)作用48h;以及BSA—AGE(400mg/L)与辛伐他汀(50μmol/L)培养条件下,GGPP(10μmol/L)作用48h。提取培养液上清,采用明胶酶谱法测定MMP-9活性;通过Western blot法检测MMP-9表达。图像光密度扫描后,统计学分析。