【摘 要】
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目的：探讨转录因子Ets1对胰岛p细胞胰岛素分泌功能和增殖的影响及其相关机制。方法：利用免疫荧光技术检测Ets1在小鼠胰腺中的表达与定位,免疫组化技术检测高脂喂养对Ets1磷酸化
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目的：探讨转录因子Ets1对胰岛p细胞胰岛素分泌功能和增殖的影响及其相关机制。方法：利用免疫荧光技术检测Ets1在小鼠胰腺中的表达与定位,免疫组化技术检测高脂喂养对Ets1磷酸化的影响。利用过表达Ets1的腺病毒感染分离的小鼠胰岛,Elisa法检测培养基中胰岛素的浓度。基因芯片技术筛选出受转录因子Ets1调控并已证实与胰岛素分泌相关的靶基因,利用腺病毒过表达或siRNA抑制Ets1表达后检测其表达变化。用染色质免疫共沉淀技术和荧光素酶报告基因技术确定Ets1调控此靶基因的机制。用EdU和MTT方法检测过表达及敲减Ets1后对Min6细胞株增殖的影响,并探讨其机制。结果：(1)转录因子Ets1主要在小鼠胰腺组织的p细胞中表达；(2)高脂喂养能够诱导小鼠胰岛中Ets1的磷酸化,在Min6细胞株中磷酸化Ets1的表达受葡萄糖浓度的调控；(3)在离体小鼠胰岛中过表达Ets1能够抑制葡萄糖刺激的胰岛素分泌；(4)过表达Ets1或抑制Ets1表达能够分别促进或抑制Txnip的表达；(5)Ets1能够直接与Txnip基因的启动子结合,并通过与p300协同作用共激活Txnip启动子报告基因；(6)过表达或抑制Ets1表达能够分别抑制或促进Min6细胞增殖,过表达Ets1能够促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21表达。结论：在胰岛p细胞中,Ets1通过激活Txnip介导糖毒性诱导的葡萄糖刺激的胰岛素分泌的损伤,并能够促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21的表达及抑制p细胞增殖。
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