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目的:构建3D打印丝素蛋白(silk fibroin,SF)/聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)/纳米羟基磷灰石(Nano-hydroxyapatite,n-HA)支架,检测其理化性能、体内急性毒性及构建异位成骨模型,探讨其作为骨组织工程支架的可行性及其对成骨和降解的影响。方法:利用3D打印技术,制备出3D打印SF/PVA/n-HA复合支架及3D打印PVA/n-HA复合支架,进行孔隙率、压缩力学性能、生物相容性的检测、体内急性毒性检测及回植大鼠肾被膜后大体观察、HE染色、RT-PC,回植动物时材料分为3组:实验组1:3D打印SF/PVA/HA复合支架;实验组2:3D打印PVA/HA复合支架。对照组-空支架组。结果:(1)扫描电镜观察:3D打印SF/PVA/n-HA复合支架结构规则,网状结构清晰,交通支连续,层层之间搭接良好,支架空隙均一。相同倍数下,3D打印PVA/n-HA复合支架网状结构连续性较差。(2)压缩力学性能:相同应力情况下(10 MPa),3D打印SF/PVA/n-HA复合支架的应变大于3D打印PVA/n-HA复合支架(P<0.05)。(3)孔隙率:3D打印SF/PVA/n-HA复合支架的孔隙率(59.87±1.33%)大于3D打印PVA/n-HA复合支架(46.26±1.21%)(P<0.05)。(4)细胞毒性检测:不同时间点(1天,3天,5天)两组支架的细胞增殖率无明显差别(P>0.05)。(5)急性细胞毒性试验:材料浸提液腹腔注射后,72h观察期间内各组大鼠均存活良好,各组大鼠体质量变化无差别(P>0.05);(6)HE染色:2月末时,实验组1中可见支架实体材料中有组织长入。RT-PCR:检测基因包括Runx-2、Col、Rankl、IL-1。对以上4个基因实验组1与实验组2在1月末和2月末时都有高表达,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05);除了2月末实验组1与实验组2在Runx-2及Col的表达没有差别(P>0.05),其他各组基因各个时间点上实验组1的表达均高于实验组2(P<0.05)。结论:3D打印SF/PVA/n-HA支架具有良好的生物相容性、压缩力学性能及孔隙率;3D打印SF/PVA/n-HA支架能够促进成骨相关基因(Runx-2,Col)及破骨相关基因(Rankl,IL-1)的表达,联系2月末时实验组1的HE染色测定,我们推断加入丝素的3D打印SF/PVA/n-HA支架能够加速降解。