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竹叶(Folium Phyllostachysi nigrae)和淡竹叶(Herba Lophatheri)在我国具有悠久的药用和食用历史,是中医一味著名的清热解毒药.竹叶黄酮产品的开发利用更加引起食品、营养和医学领域的广泛关注.本论文通过对竹叶和淡竹叶资源的调查及对总黄酮制备工艺的研究,以期更好的促进竹叶的开发利用.
首先,我们采取现代色谱技术,如硅胶柱层析、薄层层析、SephadexLH-20柱层析等对毛竹叶的活性成分进行了研究,从中分离得到3个黄酮类化合物,利用现代光谱(NMR,MS,IR,UV)和色谱(HPLC)技术分析鉴定分别为异荭草素(Isoorientin)、牡荆苷(Vitexin)和苜蓿素-7-O-葡萄糖苷(Tricin-7-O-glucoside).
其次,对国内的竹叶和淡竹叶资源进行了详尽的调查研究,收集到19种不同种属的竹叶和3种淡竹叶药材,采用HPLC方法,Agilent ZORBAX Eclipse SB-C18反相分析柱,结合二级管阵列检测器(DAD),流动相为乙腈-0.5%冰醋酸梯度洗脱,同步对竹叶中四种化合物(绿原酸、异荭草素、牡荆苷和苜蓿素-7-O-葡萄糖苷)进行了定性、定量分析,并采用HPLC指纹图谱和聚类分析(HCA)相结合的方法对竹叶和淡竹叶进行鉴别和分析。结果表明,竹叶与淡竹叶化学成分类似,关系密切,HPLC指纹图谱和HCA相结合的方法能够分析不同样品之间的化学关系.同时通过四种有效成分的定量分析结果也说明鹅毛竹(Shibataea chinensis)、孝顺竹(Bambusa multiplex)、菲白竹(Pleioblastus fortunei)等都是很好的可被开发的资源.
然后,采用HPLC法测定10批不同产地淡竹叶中的总黄酮和三个活性成分(异荭草素、牡荆苷和苜蓿素-7-O-葡萄糖苷)的含量.结果发现含量各不相同.总黄酮的含量为2.15~7.95mg/g,异荭草素的含量为0.18~0.95mg/g,牡荆苷的含量为0.07~0.44mg/g,苜蓿素-7-O-葡萄糖苷的含量为0.03~0.06mg/g.这是首次对淡竹叶药材中三种活性成分的HPLC测定,方法简便有效.考察的淡竹叶药材均具有相似的指纹图谱,可应用于药材的质量控制.
此外,在竹叶黄酮工艺开发研究中,选择AB-8作为制备竹叶和淡竹叶黄酮的最佳树脂,并对制备总黄酮的工艺参数进行了研究.结果表明,经大孔树脂富集后,UV法测得淡竹叶总黄酮含量为52.3l±1.45%;毛竹叶提取物中总黄酮含量为66.31±2.16%;鹅毛竹叶总黄酮含量为42.61±1.51%.该工艺稳定、简便,可以更好的开发利用竹叶.