Leptin促进卵巢癌细胞SKOV3侵袭转移及机制研究

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【目的】检测Leptin对卵巢癌SKOV3细胞侵袭转移的影响并对其机制进行研究。  【方法】用人重组Leptin蛋白对卵巢癌SKOV3细胞进行处理,Transwell技术检测对照组与Leptin处理24小时后的SKOV3细胞的迁移、侵袭能力;显微镜下观察各组细胞形态;采用小分子RNA干扰技术干扰TWIST1基因表达;运用RT-PCR,Real-time PCR技术分别比较各组SKOV3细胞的mRNA表达情况;Western blot技术检测各组细胞相关基因蛋白水平表达情况。  【结果】Leptin处理后的SKOV3细胞迁移及侵袭能力均较对照组明显增强,细胞形态发生明显变化。与对照组相比,Leptin处理后的SKOV3细胞E-cadherin的表达量在mRNA水平及蛋白水平均有明显下调,同时该组细胞的N-cadherin及  Vimentin表达均明显增高。此外,Leptin处理后的SKOV3细胞TWIST1基因表达在mRNA及蛋白水平均较对照组明显增加。siRNA沉默TWIST1基因后再用Leptin处理SKOV3细胞,较单纯Leptin处理组相比,迁移及侵袭能力明显降低,同时在mRNA及蛋白水平,E-cadherin的表达水平增加,N-cadherin及Vimentin的表达降低。  【结论】Leptin能促进卵巢癌SKOV3细胞的迁移和侵袭,其机制可能是通过Leptin上调SKOV3细胞中TWIST1基因表达,促进其发生上皮间质化,从而促进SKOV3细胞的侵袭转移。
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