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目的： 内分泌治疗是雌激素受体（estrogen receptor，ER）阳性的乳腺癌患者常用的药物治疗方法。Tamoxifen作为抗雌激素药物临床治疗ER阳性乳腺癌有30余年，临床广泛的应用使得Tamoxifen治疗敏感性下降，耐药已经成为治疗乳腺癌亟待解决的问题。然乳腺癌耐Tamoxifen的机制目前仍未充分阐明。我们前期研究表明，ClC-3氯通道可能参与了17?-雌二醇的促乳腺癌细胞增殖的作用，且依赖于ER?的表达。本研究进一步探讨ClC-3氯通道是否参与乳腺癌对Tamoxifen的耐药，为研究Tamoxifen的耐药机制提供实验依据。 方法： 以人乳腺癌上皮细胞（MCF-7）和乳腺癌耐Tamoxifen细胞（MCF-7/TAM）为研究对象。1）CCK-8细胞增殖实验检测MCF-7和MCF-7/TAM对Tamoxifen的敏感性；2）流式细胞术检测Tamoxifen对MCF-7和MCF-7/TAM细胞的周期分布影响和凋亡作用；3） Western blot技术、免疫荧光技术检测两种细胞内源性ER?、ClC-3蛋白的表达与分布；4）采用siRNA沉默技术干扰MCF-7细胞中ER?、ClC-3蛋白的表达，观察细胞中ClC-3与ER??蛋白的表达变化；5）全细胞膜片钳技术记录药物对MCF-7和MCF-7/TAM的氯电流的影响。 结果： 1.相比于 MCF-7细胞。MCF-7/TAM对 Tamoxifen的敏感性显著降低。Tamoxifen在MCF-7/TAM的IC50值约为MCF-7的3倍余。 2. Tamoxifen明显诱导MCF-7细胞周期停滞于G0/G1期，高浓度时（>30?M）且能诱导凋亡，而对MCF-7/TAM影响甚微。 3.内源性ER?蛋白表达在MCF-7细胞显著高于MCF-7/TAM细胞，后者的ER?蛋白几近于无。 4. MCF-7细胞内源性ClC-3蛋白的表达高于MCF-7/TAM细胞，在胞核核胞质分布均匀，而MCF-7/TAM细胞的ClC-3蛋白在胞核分布均匀，部分在细胞膜表面呈不规则聚集。 5.给予Tamoxifen，MCF-7细胞中ER?和ClC-3蛋白表达随作用时间增加而逐渐减少；而MCF-7/TAM细胞的ClC-3蛋白表达却有逐渐增多之势。 6. MCF-7和MCF-7/TAM的背景氯电流能可逆性的被Tamoxifen抑制。在MCF-7细胞中可观察到17?-E2诱导的氯电流并能被Tamoxifen抑制，而在MCF-7/TAM中却不能。 7.干扰MCF-7细胞的ER?蛋白表达能显著减少ClC-3蛋白的表达；而干扰MCF-7细胞中的ClC-3蛋白，ER?蛋白的表达改变则不明显。 结论： Tamoxifen耐药的乳腺癌MCF-7/TAM细胞ClC-3氯通道蛋白功能和表达显著降低，后者可能通过ER?受体介导而参与乳腺癌耐Tamoxifen的作用。