【摘 要】
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作者等通过反向扣除-差别杂交的方法(彭友良、赵文生,未发表),先以健叶总RNA反转录的cDNA为探针,筛选非亲和性稻瘟病诱导的稻叶cDNA文库,剔除掉阳性克隆,保存非阳性克隆;再分
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作者等通过反向扣除-差别杂交的方法(彭友良、赵文生,未发表),先以健叶总RNA反转录的cDNA为探针,筛选非亲和性稻瘟病诱导的稻叶cDNA文库,剔除掉阳性克隆,保存非阳性克隆;再分别以非亲和性稻瘟菌131生理小种侵染诱导的稻叶和健叶的总RNA反转录的cDNA为探针,对保存的非阳性克隆进行反向Northern确认,并对确认的克隆进行序列测定及序列同源性分析以鉴定这些克隆分别与哪类蛋白同源.利用该方法,作者等从非亲和性稻瘟菌侵染诱导的稻叶cDNA文库中共分离了2179个稻瘟菌诱导性cDNA克隆,对其中的1200个克隆进行了一端测序以及序列BLAST数据库查询后发现,有53个阳性克隆与报道的水稻或其它植物的PR(Pathogen-related)蛋白基因有很高的同源性.根据序列的比较与特征分析,推测这53个诱导性cDNA克隆可能编码PR-1、PR-2、PR-3、PR-5、PR-6、PR-8、PR-9和PR-10等PR蛋白;其中有3个克隆与大麦的PR蛋白有很高的同源性,可能为新鉴定的水稻PR蛋白基因.在此基础上,作者对其中一个全长cDNA进行了全序列测定和分析.
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