【摘 要】
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前言 子宫内膜癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,占女性恶性肿瘤的20-30%,其发病率近年来呈上升趋势。无孕激素拮抗的雌激素的长期作用是子宫内膜癌发病的高风险因素。
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前言 子宫内膜癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,占女性恶性肿瘤的20-30%,其发病率近年来呈上升趋势。无孕激素拮抗的雌激素的长期作用是子宫内膜癌发病的高风险因素。孕激素治疗子宫内膜癌已有50多年的历史,随着分子肿瘤学研究的发展,孕激素在体内、外抑制子宫内膜癌的研究已取得了一定的进展,但其作用机制仍不十分清楚。传统的观点认为孕激素与细胞浆和细胞核中的孕激素核受体（genomic progesterone receptor,gPR）结合后调节转录因子活性,通过mRNA合成特异的蛋白质,抑制肿瘤细胞增殖。近年研究表明,孕激素可在多种细胞表面与孕激素膜受体（membrane progesterone receptor,mPR）结合,迅速激活信号转导通路,发挥快速的nongenomic action（本文译为非基因作用）。 实验材料与方法 1.主要试剂与仪器 Ishikawa细胞株;胎牛血清;RPMI1640培养液;孕酮（progesterone,P）;孕激素核受体阻断剂RU486;鼠抗人磷酸化ERK多克隆抗体;鼠抗人总ERK多克隆抗体;鼠抗人CyclinD1多克隆抗体;生物素标记二抗;超净工作台;二氧化碳恒温培养箱;倒置相差显微镜;超速低温离心机;匀浆机;分光光度仪;多功能电泳仪;水浴式转印槽;自动凝胶成像分析仪。 2 实验方法 2.1 细胞培养 将Ishikawa细胞株置于含10%胎牛血清、100U/ml青霉素、100U/ml链霉素的RPMI1640培养液中,于37℃、5% CO2培养箱中培养使其贴壁生长,细胞长满后用0.25%胰酶进行传代培养。
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