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目的:观察烟熏合并气管内注射内毒素建立的慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)大鼠模型中血浆和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中S100A8/A9蛋白的浓度变化以及BALF中炎症细胞比例,大鼠肺组织中S100A8、S100A9mRNA和S100A8/A9蛋白的表达以及由S100A8/A9蛋白介导的Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)、髓样分化分子88(Myeloid Differentiation factor 88,MyD88)mRNA及蛋白的表达,探讨S100A8/A9在烟熏加气管内注射内毒素所致COPD大鼠中的作用及机制。方法:将12只健康成年雄性wistar大鼠随机分成两组:正常对照组和COPD组。烟熏加内毒素处理1月建立COPD大鼠模型。光镜下观察两组大鼠肺组织病理形态,图像分析系统检测反映肺气肿的指标MLI、MAN和PAA;瑞氏染色法检测两组大鼠BALF中细胞总数及中性粒细胞、淋巴细胞、肺泡巨噬细胞绝对值及比例;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血浆和BALF中S100A8/A9蛋白的浓度;荧光定量PCR方法检测大鼠肺组织S100A8、S100A9、TLR4和MyD88mRNA的表达情况;免疫组织化学方法检测大鼠肺组织中S100A8/A9、TLR4和MyD88蛋白表达情况。并比较两组间以上各指标的差异。结果:(1)与正常大鼠比较,烟熏加气管内注射内毒素1月后,大鼠肺组织出现了符合COPD的典型病理改变,且反映肺气肿的指标MLI、MAN和PAA也出现了明显差异(P<0.05);(2)COPD组BALF中细胞总数及各炎症细胞的绝对值均显著高于正常对照组,其中中性粒细胞及淋巴细胞比例显著高于正常对照组(P<0.05),而肺泡巨噬细胞比例则低于正常对照组(P<0.05);(3)COPD组血浆及BALF中S100A8/A9蛋白的浓度均显著高于正常对照组(P<0.05);(4)定量PCR显示:COPD组大鼠肺组织S100A8、S100A9、TLR4和MyD88mRNA的表达均显著高于正常对照组(P<0.05);S100A8、S100A9 mRNA表达量分别与TLR4、MyD88mRNA的表达量呈正相关(P<0.05)。(5)免疫组化结果显示:S100A8/A9蛋白主要表达于细胞浆和胞膜,TLR4主要表达于细胞膜,MyD88则主要表达于细胞浆。统计分析显示:与正常对照组比较,COPD组大鼠肺组织S100A8/A9、TLR4和MyD88蛋白表达显著增加(P<0.05);S100A8/A9蛋白分别与TLR4、MyD88蛋白表达量呈正相关(P<0.05)。结论:(1)烟熏加气管内注射内毒素可成功建立COPD大鼠模型;(2)COPD大鼠血浆和BALF中S100A8/A9的浓度明显升高,大鼠肺组织中S100A8、S100A9mRNA及其蛋白的表达也明显增加,提示烟熏加气管内注射内毒素能刺激S100A8、S100A9在肺组织的表达及释放增加,S100A8/A9可能作为新的炎症介质参与了COPD的发生发展;(3)S100A8/A9的受体TLR4及其通路中关键分子MyD88的mRNA和蛋白在COPD大鼠肺组织表达也明显增加,S100A8、S100A9 mRNA和S100A8/A9蛋白表达量分别与TLR4、MyD88mRNA和蛋白的表达量呈正相关,提示S100A8/A9通过上调TLR4和MyD88的表达,启动经典TLR4-MyD88炎症通路,并放大炎症反应,从而促进COPD的发生发展。