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背景:传统的针对恶性肿瘤的免疫治疗效果不佳的原因主要是由于副作用大,因而在临床推广受到极大的限制。针对肿瘤细胞表面的特异性肿瘤抗原的靶向免疫治疗方法能够准确且有效的清除体内残存的肿瘤细胞。而表达于神经胶质瘤细胞表面且也广泛表达于其它肿瘤表面的表皮生长因子受体Ⅲ型突变体是一个非常引人注目的免疫治疗作用靶点。目的:探讨GFRvⅢ胞外段修饰的树突状细胞诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对表皮生长因子Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)阳性神经胶质瘤细胞的的选择性杀伤作用。方法:我们利用rAAV系统制备重组腺相关病毒(rAAV/EGFRvⅢext/GFP),感染由人外周血单核细胞衍生而来的树突状细胞,进而诱导产生针对EGFRvⅢ特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),流式细胞仪检测树突状细胞表面CD80、CD83、HLA-DR分子的表达情况,Western blot检测EGFRvIIIext在树突状细胞中的表达,MLR检测EGFRvⅢext+树突状细胞诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的选择性杀伤作用,ELISA法检测细胞因子IL-2和IFN-γ的分泌情况。结果:结果显示为:(1)流式细胞仪检测树突状细胞表面的CD80、CD83、HLA-DR的表达分别为81.59%、67.37%、85.38%。(2)rAAV对树突状细胞的感染率达到91.37%,EGFRvⅢext蛋白在被rAAV/EGFRvⅢext/GFP感染的树突状细胞中显著表达,westernblot显示其分子量约为58kDa。(3)体外试验显示EGFRvⅢext+树突状细胞诱导的CTL细胞对EGFRvⅢ+U87胶质瘤细胞的抗原依赖性激活和特异性的杀伤作用。(4)T淋巴细胞与EGFRvⅢext+的树突状细胞共培养的上清中检测到显著的IFN-γ和IL-2活性。(5)与EGFRvⅢext+的树突状细胞共培养使T细胞大量增殖。结论:我们的研究表明在体外EGFRvⅢext+树突状细胞显著地加强了针对EGFRvⅢext+神经胶质瘤细胞U87的免疫杀伤作用。