9种常见致病军团菌基因芯片检测方法的建立

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:coolyina
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
军团菌是引起军团病(Legionnaires disease,LD)和庞蒂亚克热(Pontiacfever)的主要病原菌,它广泛存在于天然淡水环境、土壤环境和人工水域中。由于军团病容易暴发流行,并且致死率高,所以引起人们的广泛关注,对于公共卫生意义显著。但由于军团病与其他病原体引起的肺炎比较难辨别,因此建立一种快速、特异、灵敏的检测方法就尤为重要。目前针对军团菌的检测方法有主要细菌培养、血清学检测、尿抗原检测和分子生物学检测。但是现有的检测方法都具有一定的局限性,检测种类较少,相似菌种之间不容易区分,常常出现漏检、误检情况,并且检测时间长、操作的步骤繁琐,费时费力。本研究的目的就是利用军团菌的gyrB特异基因,结合基因芯片的方法,建立起一种准确、快速、高通量的针对常见致病军团菌的检测方法。   本研究针对9种常见致病军团菌:嗜肺军团菌(包括 pneumophila亚种和freseri亚种)、米克戴得军团菌、博兹曼军团菌、长滩军团菌、茴香军团菌、沃氏军团菌、戈曼军团菌、杜莫夫军团菌、菲氏军团菌,基于gyrB基因,设计了43条种特异性探针,利用61株标准菌株和近缘菌株对所设计的探针进行了筛选,最终得到28条,建立起特异检测上述9种常见致病军团菌的基因芯片。该方法在基因组DNA水平上的灵敏度为0.1 ng,纯菌水平上的灵敏度可达到103CFU/mL,具有较高的灵敏度。用我们建立的芯片检测方法对12瓶矿泉水和8例空调冷凝水进行了检测,并与16S rRNA测序结果比较,结果显示,芯片检测结果完全正确。上述实验结果表明运用基因芯片技术所建立的检测方法检测时间短、灵敏度高、特异性强,可应用于水质监测、流行病调查等领域,具有良好的可实用性。
其他文献
心房颤动是临床上最为常见的心律失常疾病之一,心房颤动的发生和维持需要多种机制共同作用。基于心房颤动家系的连锁分析已发现多个心房颤动的致病基因、染色体区域。但由于家
期刊
随着社会的进步和发展,我国新闻传播事业取得空前的繁荣。近年来,媒体市场开始进一步细分,媒体的雅俗分化显得愈加明显。本文要探讨的,就是在这愈演愈烈的雅俗分化现象的背后
本文结合北洛河铁矿复杂的地质情况,对如何形成高质量的注浆孔进行了阐述,并对注浆工作中如何采取有效措施,把好各道注浆工序的质量关,提高注浆效果进行了探讨。 Based on the c
衰老是植物发育的最后阶段,由特殊的发育信号启动与调控。植物类受体蛋白激酶(receptor-like protein kinases, RLKs)是一类包含胞外受体域、单次跨膜域和胞内激酶域的蛋白,在植
当前在中小学各科教学中,广大教师要结合本科的教学特点与实际,以开发学生智力、培养学生能力为核心,以精讲精练、加强学生指导为手段,进一步加大教法改革力度,积极在教学中
《陕西建筑报》由陕建集团总公司党委主管主办,是陕西目前唯一公开发行的建筑行业报,读者面辐射全国各省(区)、直辖市。《陕西建筑报》于1953年9月18日在西安创刊,其前身是西
中国共产党第一次全国代表大会的召开标志着中国共产党的正式成立,在目前的党史书籍中,有关中国共产党“一大”的召开有这样的文字记载:1921年7月23日晚8时,中国共产党第一次
珍惜孩子的好奇心、求知欲和创造的火花.要使学习具有思想、感情、创造、美和游戏的鲜艳色彩,成为孩子们深感兴趣又富有吸引力的事情.增强孩子的信心,使他们获得取得成功的鼓
改革开放30年来,中国报业得到了相当大的发展。但同时我们也应该看到,与报业发达国家相比,我国报业发展总体水平,尤其是地市县域报业的发展水平仍有待提高。 In the 30 year