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研究背景:子宫腺肌病(adenomyosis,AM;以下简称腺肌病)是一种严重影响妇女健康的常见病、多发病,具体发病机制不清,高雌激素刺激和局部炎症损伤为其发病高危因素。近年来,此病的发病率在育龄妇女中呈逐年上升及年轻化趋势,对有生育要求的腺肌病患者的保守性治疗已成为当前临床的难点和困局。目前公认的子宫腺肌病的发病机制涉及腺体细胞异常生长分化及入侵、子宫肌层平滑肌功能缺失、基质细胞内陷等,内膜细胞向肌层的侵袭和迁移是腺肌病发生发展的关键环节,基质金属蛋白酶家族(Matrixmetalloproteinases,MMPS)在腺肌病内膜组织侵袭和迁移机制中发挥重要作用,文献报道MMPs家族可以通过降解细胞外基质成分而促进组织侵袭和迁移。许多研究已证实子宫腺肌病存在MMP9表达异常,上调MMP9的表达可促进内膜细胞的侵袭,但相关调控机制及细胞信号通路尚未明确。核因子 E2-相关因子 2(NuclearFactor-E2-relatedfactor2,Nrf2)是氧化还原调节机制中的核心蛋白,参与多种炎性应激、退化性相关疾病及恶性肿瘤发病及进展过程。近年研究发现,Nrf2与子宫内膜癌细胞侵袭迁移功能密切相关。然而,作为慢性炎症及氧化应激相关的疾病,子宫腺肌病发病机制中是否存在Nrf2通路参与尚未见相关报道。在腺肌病局部组织内,Nrf2与MMP9表达是否存在相关性也尚不明确。本实验拟收集临床标本,多种方法检测子宫腺肌病内膜Nrf2表达水平,明确其表达差异在子宫腺肌病发病进展中的作用,并在体外细胞水平激活或抑制Nrf2表达,观察MMP9表达变化及细胞迁移能力改变,进一步阐明Nrf2参与子宫腺肌病发病的分子机制。研究目的:本研究旨在探讨Nrf2在子宫内膜组织上的表达及其与子宫腺肌病的相关性,并在体外细胞水平上探讨Nrf2参与子宫腺肌病发病的分子机制。材料与方法:收集2015年6月至2016年2月在我院手术的子宫腺肌病患者20例为腺肌病组,收集同期在我院手术的子宫颈癌Ia期患者20例为对照组,两组年龄匹配,每组各含10例增生期内膜和10例分泌期内膜,于术中取子宫后壁中段内膜组织2*2cm2。通过免疫组化法检测Nrf2在子宫内膜组织中的定位表达;通过Real-timePCR法和Western Blot法检测子宫腺肌病与正常子宫内膜组织中Nrf2 mRNA及蛋白表达水平的差异。培养原代子宫内膜腺上皮细胞,构建Nrf2蛋白过表达及低表达细胞模型,通过Real-time PCR、Western Blot、细胞划痕试验法观察Nrf2过表达和抑制后细胞MMP9蛋白表达水平及细胞迁移能力的变化。结果:1.子宫内膜组织存在Nrf2蛋白表达,腺肌病在位及异位内膜组织上Nrf2蛋白表达水平显著高于正常内膜组织(P<0.05);子宫内膜腺上皮细胞上存在Nrf2蛋白表达。2.子宫腺肌病内膜组织与正常子宫内膜组织相比较,Nrf2mRNA表达水平无显著差异(P>0.05),而腺肌病内膜组织中的Nrf2蛋白表达水平较正常子宫内膜组织显著升高(P<0.05)。3.子宫内膜腺上皮细胞Nrf2过表达后,MMP9 mRNA和蛋白表达水平显著升高、细胞迁移速度显著增快(P均<0.05);子宫内膜腺上皮细胞Nrf2低表达后,MMP9mRNA和蛋白表达水平显著下降、细胞迁移速度显著减慢(P均<0.05)。结论:1.子宫内膜组织存在Nrf2蛋白表达,其表达水平升高与子宫腺肌病发病密切相关。2.Nrf2蛋白可通过上调子宫内膜腺上皮细胞MMP9的表达,促进细胞迁移,从而参与子宫腺肌病发病。