肺癌患者血浆miRNA-20a和miRNA-210表达的诊断意义

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目的:本研究通过检测肺癌患者和肺良性疾病患者血浆miRNA-20a和miRNA-210的表达水平,探讨这两个血浆miRNAs对肺癌的诊断意义。方法:1、研究对象:选择58例临床上未接受任何治疗的确诊肺癌患者和46例良性肺疾病患者作为研究对象。2、引物设计与合成:miRNA-20a、miRNA-210及内参U6基因的引物设计与合成由锐博生物公司提供。3、研究方法:采集研究对象的外周血标本,分离血浆,提取血浆总RNA,逆转录合成cDNA,荧光定量PCR反应测定血浆miRNA-20a和miRNA-210的Ct值,应用公式:目的基因Ct值-内参基因Ct值=△Ct值,采用2-△△Ct的分析方法计算所测血浆中miRNA-20a和miRNA-210的表达水平。4、统计学分析:使用SPSS19.0统计软件分析实验数据。两组间比较用Wilcoxon秩和检验,P<0.05表示差异有统计学意义。根据血浆miRNA-20a和miRNA-210检测结果构建受试者工作特征(ROC)曲线图,获得诊断肺癌的ROC曲线下面积(AUC),并确定诊断肺癌的最佳临界值,计算诊断肺癌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确性。结果:1、肺癌患者血浆中miRNA-20a和miRNA-210的表达水平均明显高于良性肺疾病对照组(P<0.05)。2、血浆miRNA-20a的表达水平与患者的临床病理特征未见相关性,而血浆miR-NA-210表达与肺癌的组织学类型、分化程度及临床分期显著相关(P=0.008、P=0.041 和 P=0.016)。3、血浆miRNA-20a和miRNA-210的ROC曲线下面积AUC分别为0.883(95%可信区间0.821~0.946)和0.824(95%可信区间0.745~0.904),高于血清癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白 19(Cyfra21-1)的0.656(95%可信区间0.551~0.761)和 0.754(95%可信区间 0.658~0.847)。4、血浆miRNA-20a和miRNA-210诊断肺癌的敏感性(77.6%和75.9%)和准确性(81.7%和77.9%)高于血清CDA(44.8%和62.5%)和Cyfra21-1(56.9%和72.1%),联合检测这两个血浆miRNAs能进一步提高诊断肺癌的敏感性,但特异性略有下降。5、这两个血浆miRNAs联合血清CEA或Cyfra21-1可进一步提高对肺癌的诊断效果。6、采用诊断试验的一致性检验来比较四种肿瘤标志物显示miRNA-20a和miRN-A-210 的 kappa 值(分别是 42.763 和 32.534,均p 0.001)明显高于 CEA(10.383,p=0.001)和 Cyfra21-1(26.005,p<0.001)。结论:1、血浆miRNA-20a和miRNA-210有可能作为诊断肺癌很有前途的生物标志物。2、对于肺癌的诊断,血浆miRNA-20a和miRNA-210的诊断效果优于血清CEA和Cyfra21-1。
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