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研究目的:
通过开展隐孢子虫病原体形态学和分子生物学检测方法,探索我国艾滋病隐孢子虫致慢性腹泻的发病率、流行病学特征和中医证候学分布规律,为提高艾滋病慢性腹泻的诊治水平服务。
方法:
1、收集北京地坛医院、河南省中医药研究院、广州第八医院、北京佑安医院、新疆传染病、广西龙潭医院6家医院311例HIV/AIDS相关慢性腹泻患者粪便,采用蔗糖密度梯度离心法对患者粪便标本进行集卵,Nested PCR方法检测隐孢子虫卵囊,通过对Nested PCR方法和改良抗酸染色法两种方法比较,明确艾滋病相关慢性腹泻的隐孢子虫诊断,同时在本地医院筛查常见艾滋病慢性腹泻病原体。
2、根据隐孢子虫检测结果,将311例艾滋病隐孢子虫感染慢性腹泻病例病例分成隐孢子虫感染组,非隐孢子虫感染组,进而从患者的性别、年龄、感染途径、生活环境、患病季节、疾病分期、CD4+T淋巴细胞计数、临床症状、伴随症状、中医证型等方面进行统计学分析,调查隐孢子虫感染慢性腹泻人群的流行病学资料,分析艾滋病隐孢子虫感染慢性腹泻病例的中西医临床病证特征。
结果:
1、311例艾滋病慢性腹泻的粪便标本中通过Nested PCR法检测出37例隐孢虫感染病例,感染率为11.9%。通过改良抗酸染色法检测出32例隐孢虫感染病例,感染率为10.3%。两种检测方法Kappa=0.4298(95%CI:0.273～0.5866),McNemar检验S=0.7143(P=0.3980),两种检测方法的阳性率基本一致,差异无统计学意义。
2、根据调查结果,北京、河南、新疆三地艾滋病患者隐孢子虫感染率分别为13.51%,67.57%,18.92%,三地之间差异有统计学意义(X2=4.931,P＜0.05)。其中,男性与女性艾滋病慢性腹泻患者隐孢子虫感染率分别为59.46%和40.54%,差异无统计学意义(X2=0.634,P＞0.05)。城市与农村艾滋病患者隐孢子虫感染率分别为27.03%和72.97%,差异有统计学意义(X2=4.100,P＜0.05)。夏秋季(6-111月)与其他季节的艾滋病患者隐孢子虫感染率分别为86.48%和13.51%,差异无统计学意义(X2=1.830,P＞0.05)。急性感染期,HIV无症状期,AIDS期,隐孢子虫感染率分别为0%,29.73%,70.27%,差异有统计学意义(X2=7.646,P＜0.01)。CD4＜200cells/ul占70.27%,CD4200-499cells/ul占29.73%,CD4≥500cells/ul占0%,差异有统计学意义(x2=10.33,P＜0.01)。
3、隐孢子虫感染所致艾滋病相关慢性腹泻患者的大便性状为溏便、水样便、溏结不调、便血、粘液便的发生率分别为70.27%,29.73%,13.51%,0%,5.41%,差异有统计学意义(X2=19.22,P=0.000)。腹泻次数中轻(2-3次/日),中(4-5次/日),重(＞5次/日)的发生率分别为24.32%,59.46%,21.62%,差异无统计学意义(X2=2.656,P=0.103)。腹胀的程度中无,轻,中,重的发生率分别为51.35%,27.03%,21.62%0%,差异有统计学意义(X2=24.91P=0.000)。腹痛性质中绞痛,隐痛的发生率27.03%,18.92%,差异有统计学意义(X2=5.437,P=0.020)。腹泻伴随症状中排便感异常,里急后重,泻下急迫,肛门下坠感,排便不爽的发生率分别为40.54%,24.32%,21.62%,18.92%,10.81%,差异无统计学意义(X2=0.693,P=0.405)。
4、电子肠镜检查结果异常的患者中CD4＜200cells/ul113(81.88%),CD4≥200cells/ul69(80.23%),P＞0.05,差异无统计学意义。28例艾滋病隐孢子虫腹泻患者肠镜的检查结果:直肠炎8例、直肠炎+结肠炎5例、正常5例、结肠炎4例、结肠炎+结肠息肉2例、结肠炎+直肠息肉1例、直肠息肉1例、直肠憩室1例、HP+1例,构成比分别为28.57%、17.86%、17.86%、14.29%、7.14%、3.57%、3.57%、3.57%、3.57%。311例艾滋病慢性腹泻病例中存在真菌、隐孢子虫、CMV、结核杆菌、艰难梭状芽孢杆菌、空肠弯曲菌、沙门氏菌、圆孢子虫多种病原体感染,感染率分别为64.31%、11.90、3.22%、2.25%、1.29%、0.64%、0.32%、0.32%。隐孢子虫感染组合并真菌感染与未合并真菌感染分别为24(12%),11(9.9%),差异无统计学意义(X2=0.312,P=0.576)。37例隐孢子虫感染慢性腹泻患者中血象正常、血象高于正常值、血象低于正常值百分比分别为69.44%,13.89%,16.67%。差异无统计学意义(X2=3.978,P=0.137)。37例隐孢子虫感染慢性腹泻患者中便常规正常的患者与便常规异常的患者所占百分比分别为89.18%、10.82%。差异无统计学意义(X2=0.430,P=0.512)。
5、37例隐孢子虫感染的艾滋病相关慢性腹泻患者中医证候学分布中,脾虚湿盛21(56.76%)、湿热阻滞6(16.22%),脾肾阳虚7(18.91%)、脾虚3(8.11%)、寒热错杂0(0%)。差异无统计学意义(X2=0.430,P=0.512)。
结论:
1、艾滋病慢性腹泻病例中存在真菌、隐孢子虫、CMV、结核杆菌、艰难梭状芽孢杆菌、空肠弯曲菌、沙门氏菌、圆孢子虫等多种病原体感染,其中以真菌、隐孢子虫居多,感染率分别为64.31%、11.90%。311例慢性腹泻患者隐孢子虫的监测方法中,Nested PCR法阳性检测率11.9%。改良抗酸染色法阳性检测率10.3%,两种方法均可从HIV/AIDS相关慢性腹泻患者粪便中检出隐孢子虫,两种方法的检出率是一致的,但形态学检测方法简便易行,值得在基层推广。
2、隐孢子虫感染率与患者的性别、季节无关;其中农村艾滋病患者隐孢子虫感染率高于城市患者;患者在CD4T淋巴细胞计数＜200cells/ul,疾病发展到晚期时,更易发生隐孢子虫感染。艾滋病隐孢子虫感染慢性腹泻的肠镜结果以直肠炎、结肠炎居多。血象、便常规无明显特异性。
3、艾滋病隐孢子虫感染慢性腹泻临床表现为严重的水样泻,腹泻次数多,伴有脱水,患者常表现为轻度的腹胀、腹痛,其中腹痛的以绞痛为主。艾滋病隐孢子虫感染慢性腹泻的患者中证型分布以脾虚湿盛、脾肾阳虚居多,与非隐孢子虫感染艾滋病相关慢性腹泻的中医证型分布基本一致。