论文部分内容阅读
子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)简称内异症,是一种炎症性和雌激素依赖性疾病,指具有生物活性的子宫内膜组织出现在子宫腔以外的其他部位,主要转移部位是盆腔腹膜、卵巢、阴道直肠凹陷。该病的临床表现多种多样,以痛经、不孕、月经量异常等为主要症状。组织病理学上虽为良性病变,但却具有增生、浸润、转移及复发等恶性特征,是育龄妇女常见疾病之一,发病率较高,约为10%-15%,且有逐年上升趋势。目前,该疾病的治疗仍以激素药物和手术治疗为主,其效果并不理想,严重影响女性患者的生活质量及身心健康。子宫内膜异位症的病因是多因素的,复杂的,个体性的。种植学说已被公认,Sampson1921年首次提出经血逆流种植学说,经期子宫内膜细胞通过输卵管逆行至腹腔,可种植于卵巢和盆腔腹膜并在该处粘附、存活、生长,形成异位病灶。然而,约有90%的妇女在经期有经血逆流现象,但却只有15%-20%的妇女患有子宫内膜异位症,这是我们至今无法解释清楚的现象。有学者提出免疫因素、遗传因素、炎症因素等多方面原因导致内异症的形成。郎景和等在国际上首次提出的“在位内膜决定论”是子宫内膜异位症发病机制研究过程中一个新的里程碑,认为内异症和非内异症患者的在位内膜存在基因的差异、基因表达的差异和粘附、侵袭、血管形成能力明显增强的差异,使之更容易形成内异症。有研究表明,甚至在卵巢切除的动物中也有子宫内膜异位病灶的生长和发展。这表明,除了卵巢类固醇激素外,盆腔的先天性免疫调节系统也参与内异症发生和发展。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是一种固有免疫受体,参与固有免疫的关键环节,其有两个显著的生物学功能：一、促进各种细胞因子的合成和释放,诱发炎症反应；二、促进抗原呈递细胞的成熟,诱导机体产生获得性免疫反应。而TLR4又是TLRs中关键的一个分子,其免疫调节失衡与多种疾病的发病机制有关。TLR4参与的细胞信号转导通路包含MyD88依赖性和非依赖性信号转导通路,MyD88依赖性信号转导通路又分为NF-ＫB和AP-1两路,即活化的TLR4将通过TLR4/MyD88/NF-ＫB和TLR4/MyD88/AP-1两条信号通路诱导产生一系列炎症介质包括前炎症因子、细胞因子、趋化因子等,从而产生强效的炎症反应。目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor,TLR4)介导的髓样分化因子(myeloid differentiation factor,MyD88)/激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)通路在子宫内膜异位症(内异症)患者在位内膜、异位内膜及正常子宫内膜中的表达变化及意义。材料与方法1研究对象选择2011年9月到2012年4月在郑州大学第三附属医院妇科住院,行腹腔镜或开腹手术,同时经病理证实为卵巢EMs的患者45例,年龄20-46(30.5±6.9)岁,采用美国生育学会1985年修订的内异症分期标准(r-AFS)进行分期,其中ⅠⅡ期15例,Ⅲ、Ⅵ期30例。分别取其异位内膜组织45例为异位内膜组,在位内膜30例为在位内膜组。另选取同期因畸形纵隔子宫行宫腔镜手术的患者30例,取其正常内膜为对照组,年龄21-37(29.0±7.4)岁。各组患者在年龄上的差异无统计学意义(P>0.05)。所有患者对该研究均知情同意,月经周期规律,术前6个月未接受激素治疗,排除子宫腺肌症及肿瘤病史者,无严重内科合并症。2实验方法采用逆转录-PCR及免疫组织化学(SP)法检测TLR4、MyD88及AP-1mRNA和蛋白在异位内膜、在位内膜、正常内膜组织中的表达。3统计学方法采用SPSS17.0软件包进行数据统计分析,以均数士标准差(x±s)表示,并且对数据进行正态性和方差齐性检验,3组间比较采用单因素方差分析(ANOVA),组间两两比较采用最小显著性差异法(LSD-t法),EMs I、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期的比较采用两独立样本t检验,两变量间的相关性采用Pearson相关分析。检验水准：a=0.05。结果1.在内异症患者异位内膜组、在位内膜组及对照组中TLR4、MyD88和AP-1mRNA和蛋白的表达有差异,差异有统计学意义(P<0.05),且内异症患者异位内膜组(mRNA:0.156±0.017,0.272±0.023,0.243±0.026)、(蛋白：60.765±±15.550,59.628±±8.016,43.967±3.836)和在位内膜组(：mRNA:0.139±0.015,0.243±±0.025,0.214±0.024)、(蛋白：42.196±±12.388,52.372±±7.160,35.200±±3.587)的表达均明显高于对照组(mRNA：0.1244±0.014,0.221±±0.028,0.1964±0.035)、(蛋白30.786±±11.121,46.772±±5.020,31.437±±3.221),差异有统计学意义(P<0.05)；内异症患者异位内膜组的表达明显高于在位内膜组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.在内异症患者异位内膜组和在位内膜组中TLR4、MyD88和AP-1mRNA、蛋白在内异症患者Ⅲ、Ⅳ期的表达水平(mRNA：0.156±±0.016,0.2744±0.021,0.250±±0.024)、(蛋白：62.251±±15.182,59.919±±7.978,45.262±±2.967)略高于Ⅰ、Ⅱ期(]mRNA0.1544±0.019,0.269±0.028,0.231±±0.027)、(蛋白：57.793±±16.380,59.047±±8.338,41.376±±4.151),但差异无统计学意义(P>0.05)。3.异位内膜组中TLR4与MyD88、AP-1分别呈显著线性正相关mRNA分别为0.812,0.719,P<0.05;r蛋白分别为0.639,0.648,P<0.05)；在位内膜组中TLR4与MyD88、AP-1分别呈显著线性正相关(rmRNA分别为0.594,0.679,P<0.05；r蛋白分别为0.560,0.575,P<0.05)；对照组中TLR4与MyD88、AP-1分别无显著线性相关性(rmRNA分别为0.334,0.097,P>0.05；r蛋白分别为0.358,0.170,P>0.05)。结论1.TLR4/MyD88/AP-1信号转导通路可能在子宫内膜异位症的发病机制中起着重要作用。2.TLR4/MyD88/AP-1信号转导通路可能只参与了子宫内膜异位症的早期发病,不影响疾病的进展。