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研究背景：颅骨修补已有百年历史，修补材料很多，但至今还没有一种材料能在塑形、抗冲击、抗压力、隔温、防磁等方面完全替代颅骨。因此有人用自体颅骨瓣在自体皮下埋藏保存二期回植，病人在骨瓣埋藏和取出时将经受两次手术的痛苦，同时埋藏的骨瓣也易吸收变薄；也有人将骨瓣放入骨库中进行深低温冷藏，二期手术时取回复温使用，但这种方法需要专业冷藏设备，限制其推广应用。颅脑外伤或肿瘤手术，为了降低颅内压，往往须进行去骨瓣减压术，造成颅骨缺损，而病人所取下骨瓣往往又是完整的，丢弃十分可惜。而二期采用目前流行的钛合金网进行颅骨修补，价格昂贵，隔温、生理弯曲欠完美，如果利用离体灭活多孔骨瓣外加骨细胞生长因子(rhBMP-2)进行颅骨修复成功，方法简单、费用经济且又兼顾美观，我们查阅国内外文献尚未见相关研究，特别是对其成骨过程的机理缺乏深入的基础研究，结合我们临床研究已证实此方法的可行性及所取得的显著效果，我们设想：rhBMP-2能以离体高温灭活多孔骨瓣能为生物修复支架材料，诱导内源性成骨细胞因子的表达，并进一步诱导硬脑膜及汕头大学医学侠硕士研究生学位七仑文:展舜倪契扭生物性修复的实脸研究骨膜的的多分化潜能的骨祖细胞向骨细胞分化，从而完成颅骨缺损的生物性修复。 实验目的:为了探索颅骨缺损生物性修复的可行性及修复机制，拟通过对受区内源性成骨细胞因子(BMP一2及TGF一pl)的动态检测和受区骨支架的病理学研究，以阐明离体高温灭活多孔骨瓣外加rhBMP一2作为修复支架材料修复颅骨缺损的机制，并确定自体灭活多孔骨瓣能否成为理想的颅骨缺损修复的支架材料。 实验材料及方法:实验动物为健康成年纯种新西兰大白兔156只，雌雄不限，体重在2.3士0.3 kg，随机分两大区组制作颅骨缺损模型，将取出的颅骨用高速颅钻钻成多孔骨瓣，经高温煮沸30分钟，对照组单纯离体灭活多孔骨瓣原位回植，实验组每块离体灭活多孔骨瓣外加rhBMp一2 0.smg。两大区组:(l)免疫组织化学组，其中再分为正常对照组(60只)、实验组(60只)，分别于3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25天时处死动物取材，每个时限点5只动物，分别进行内源性BMP一2及TGF一日l的免疫组织化学动态检测;(2)常规检查组，其中再分为正常对照组(6只)、实验组(30只)，分别于2、4、6、8、10、12周时处死动物取材，每个时限点5只动物，分别进行大体观察、组织学、扫描电镜检查。 实验结果:1.大体形态: 2周时受区骨膜与脑膜增生变厚并与骨瓣结合紧密，开始建立血运，但骨瓣基本仍为死骨，界面有纤维结缔组织长入;4周时受区骨汕头大学医学忱硕d卜月玲究生学七比论文:烦劳缺报生物性修复的实脸研究膜与脑膜与骨瓣结合更紧密，血运丰富，界面大量纤维结缔组织长入，但仍不牢固;6周时受区血运丰富，界面有韧感;8周时骨膜与脑膜有结缔组织长入死骨，界面为软骨结合，骨瓣血运丰富;10周时界面开始部分出现骨性结合，结合牢固，骨瓣血运丰富;12周已基本为新生骨代替，形成骨性愈合。而对照组骨瓣仍遗留少量死骨。2.组织学检查: 2周时:受区见纤维结缔组织长入，少量炎症细胞浸润，周围有软骨痴及骨痴形成，未见血管形成;4周时:受区开始可见成骨细胞增殖活跃，同时有编织骨形成，见少量小血管腔;6周时:受区新生骨痴大量增加，连成大片状，出现大量骨髓细胞;8周时:移植骨与周围骨面软骨融合，新生骨痴“爬行代替”移植皮质骨，缺损区可见骨化中心，骨小梁、骨岛遍布其中，见少量再通骨髓腔及皮质血管;10周时:移植骨与周围骨面融合，成骨现象普遍，新生骨痴逐渐“爬行代替”移植皮质骨，缺损己基本骨化，并可见散在骨岛，呈骨性愈合，见再通骨髓腔及皮质血管;12周时，新生骨增殖活跃，骨构建完善，形成许多骨小梁，皮质形成，骨髓腔再通，而对照组骨瓣仍遗留少量死骨腔。3.电镜检查: 2周时:受区有大量来自硬脑膜及骨膜的纤维结缔组织长入;4周时:受区见大量新骨形成，骨细胞增殖活跃，新骨与支架骨交织在一起.;6周时:受区陷窝周围可见较多新生骨形成，成骨活跃;8周时:受区大量新骨，新骨陷窝内出现多个扁椭圆形骨化中心、有许多突起汕头大学医学称忆祠咬士研免生学位勺仑大:汉骨甸矢报生物性修文的实脸月开究的骨细胞;10周时:受区骨髓腔内出现新生不成熟骨组织及骨小梁，可见钙化球及新骨形成;12周时:受区支架周围，新生的骨小梁融合，许多骨陷窝内可见到骨细胞，界面骨性愈合。4.内源性BMP一2免疫组织化学检查: 术后3天在硬脑膜的多能间充质细胞胞质内可见浅染的棕黄色颗粒，表达强度为(士);术后5天细胞胞质内浅染的棕黄色颗粒，颜色加深，表达强度为(+);术后7天表达强度为(++);术后9天表达强度为(+++);术后11、13、15、17天在硬脑膜均可见大量的多能间充质细胞胞质深染的棕黄色颗粒，表达强度为(++++)，而在术后19、21天表达强度开始出现下降为(+十十);术后23天表达强度继续下降为(++);而术后25天见表达阳性的细胞数目明显减少，表达强度为(+)。在7天、15天、21天阳性细胞?