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目的：通过体外培养和裸鼠皮下移植人肝癌SMMC-7721细胞，观察绿茶提取物EGCG单体对人肝癌细胞株SMMC-7721体内外增殖、凋亡的影响，并探讨可能的作用机制。拟为绿茶提取物用于临床肝癌治疗提供理论依据，也可能为肝癌治疗提供新的思路和新的方法。
方法：
1.体外复苏、培养人肝癌SMMC-7721细胞并采用不同浓度的EGCG单体溶液对其进行干预。将对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞，以3.6×103/孔的密度接种于96孔板，待细胞贴壁后加入EGCG单体溶液，使EGCG单体终浓度为10μg/ml、40μg/ml、80μg/ml，继续培养，分别于24h、48h、72h用。MTT法观测EGCG单体溶液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖能力的影响，按公式：抑制率(inhibition ratio，IR)=[1-(实验组平均A570值-空白组A570)/(对照组平均A570值-空白组A570)]×100％计算IR；将对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞，以2.7×104/孔的密度接种于24孔板，待细胞贴壁后分别加入EGCG单体溶液，使EGCG单体终浓度为10μg/ml、40μg/ml、80μg/ml，继续培养72h，用免疫细胞化学法结合图象分析技术检测人肝癌SMMC-7721细胞中Ki67的表达变化；将对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞，以5.4×105/孔的密度接种于6孔板，待细胞贴壁后分别加入EGCG单体溶液，使EGCG单体终浓度为10μg/ml、40μg/ml、80μg/ml，继续培养48h，用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测EGCG单体溶液对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。
2.将对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞密度调整为1.5×107/ml，以每鼠0.2ml接种于裸鼠腋窝皮下。待皮下移植瘤形成后，将裸鼠随机分为实验组和对照组，每天分别给予EGCG单体溶液50mg/kg只灌胃和生理盐水灌胃，3周后瘤块离体称重。按公式抑瘤率=(1-实验组瘤重/对照组瘤重)×100％计算抑瘤率；用免疫组织化学法检测移植瘤中人肝癌SMMC-7721细胞Ki67的表达变化；用TUNEL法检测移植瘤中人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的情况。
结果：
1.肝癌细胞体外实验结果显示，在EGCG单体溶液的作用下，人肝癌SMMC-7721细胞增殖能力明显受到抑制(P<0.05)，并表现出量效和时效关系，Ki67表达水平下调(P<0.05)，流式细胞仪检测细胞凋亡明显增加(P<0.05)。
2.动物体内实验结果显示，实验组裸鼠经EGCG单体溶液灌胃后，皮下移植瘤体积、重量明显小于对照组，抑瘤率为30.13％±5.17％，实验组移植瘤中人肝癌SMMC-7721细胞Ki67表达水平下调(P<0.05)，TUNEL法检测实验组移植瘤中人肝癌SMMC-7721细胞凋亡明显多于对照组(P<0.05)。
结论：
1.绿茶提取物EGCG单体对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖具有抑制作用，并可抑制人肝癌SMMC-7721细胞中Ki67的表达，同时可以促进肝癌细胞凋亡。
2.绿茶提取物EGCG单体对人肝癌SMMC-7721细胞的裸鼠皮下移植瘤也具有生长抑制作用，同时抑制移植瘤中人肝癌细胞Ki67的表达并促进人肝癌细胞凋亡。
3.EGCG单体的抑瘤作用可能通过抑制人肝癌细胞增殖、增加其凋亡并下调肝癌细胞Ki67表达来实现。
4.绿茶提取物EGCG单体表现出较好的临床应用前景，可望成为临床肝癌治疗新的价廉易得的植物药。