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背景：柚皮素是一种来源丰富，具有良好生物活性的二氢黄酮类化合物。研究表明，柚皮素能明显地抑制P-gp的活性，从而影响自身或其他药物的代谢动力学行为甚至改变药物效应；柚皮素亦能阻抑NF-κB的表达及活性，从而影响靶基因及蛋白的表达，发挥抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理作用。但围绕柚皮素对MDR1mRNA及P-gp表达影响的研究却鲜有报道，就柚皮素、MDR1mRNA及P-gp、NF-κB三者间的关联亦有待阐明。基于NF-κB是众多细胞信号通路中调控MDR1转录及P-gp表达的重要核转录因子之一，研究柚皮素对MDR1mRNA、P-gp表达的影响及其与NF-κB间的关联，可为柚皮素对P-gp影响的分子生物学机制研究提供新思路。目的：建立及评价稳定高表达MDR1mRNA及P-gp的K562/A02细胞模型，在此基础上，采用RT-PCR、Western-blot等技术手段研究柚皮素对MDR1基因转录、P-gp表达的影响及其与NF-κB间的关联，初步探讨柚皮素对P-gp影响的分子生物学机制。方法：1.规范化培养K562/A02细胞，以1μg/ml阿霉素维持细胞耐药性，实验前2周脱药培养，观察细胞生长状况，绘制细胞生长曲线。2.采用MTT法检测PDTC、阿霉素、柚皮素对K562/A02的细胞毒性作用，选取细胞存活率大于80%的条件进行后续实验。3.将不同浓度NF-κB特异性抑制剂PDTC和NF-κB促进剂阿霉素单独或联合作用于K562/A02细胞模型48h后，采用RT-PCR、Western-blot等技术手段检测MDR1mRNA及P-gp表达水平的变化，评价K562/A02细胞模型MDR1mRNA及P-gp的表达情况。4.将不同浓度柚皮素单独或联合5μM阿霉素作用于K562/A02细胞模型48h后，采用RT-PCR、Western-blot等技术手段检测MDR1mRNA及P-gp表达水平的变化，评价柚皮素对K562/A02细胞MDR1mRNA及P-gp表达的影响。5.将500μM柚皮素、25μM PDTC单独或联合5μM阿霉素作用于K562/A02细胞模型48h后,采用RT-PCR、Western-blot等技术手段检测MDR1mRNA及P-gp表达水平的变化，比较各组间的差异，探讨柚皮素、MDR1mRNA及P-gp、NF-κB三者间的关联。结果：1.与空白组相比，5～100μM PDTC作用于K562/A02细胞48h后能明显下调其MDR1mRNA及P-gp的表达（P＜0.05），且抑制作用随浓度的增加而增强。2.与空白组相比，0.5～15μM阿霉素作用于K562/A02细胞48h后，0.5～15μM阿霉素能明显上调其MDR1mRNA的表达（P＜0.05），1～15μM阿霉素能明显上调其P-gp的表达（P＜0.05），且促进作用随浓度的增加而增强。3.与阳性对照组（5μM阿霉素）相比，5～100μM PDTC与5μM阿霉素联合作用于K562/A02细胞48h后，25μM、50μM PDTC明显下调其MDR1mRNA的表达（P＜0.05），5μM、25μM、50μM PDTC明显下调其P-gp的表达（P＜0.05），且抑制作用均随PDTC浓度的增加而增强。4.与空白组相比，25～500μM柚皮素作用于K562/A02细胞48h后，100～500μM柚皮素明显下调其MDR1mRNA的表达（P＜0.05），50～500μM柚皮素明显下调其P-gp的表达（P＜0.05），且抑制作用随柚皮素浓度的增加而增强。5.与阳性对照组（5μM阿霉素）相比，25～500μM柚皮素与5μM阿霉素联合作用于K562/A02细胞48h后，250μM、500μM柚皮素明显下调其MDR1mRNA的表达（P＜0.05），50～500μM柚皮素明显下调其P-gp的表达（P＜0.05），且抑制作用均随浓度的增加而增强。6.与25μM PDTC组相比，500μM柚皮素作用于K562/A02细胞48h后，能同等程度抑制其MDR1mRNA及P-gp的表达（P＞0.05）；与25μM PDTC与5μM阿霉素联合作用组相比，500μM柚皮素与5μM阿霉素联合作用于K562/A02细胞48h后，能同等程度抑制阿霉素诱导MDR1mRNA及P-gp的表达（P＞0.05）。结论：1.本研究建立的K562/A02细胞模型能稳定特异性高表达MDR1mRNA及P-gp，是研究药物、MDR1mRNA及P-gp、NF-κB三者间关联的适合且可靠的细胞模型。2.柚皮素能抑制K562/A02细胞MDR1mRNA及P-gp的表达，而其机制可能是柚皮素阻抑NF-κB的活化，从而抑制MDR1的转录，导致MDR1mRNA及P-gp的表达量下调，最终使得P-gp的生物活性下降。