苦瓜中黄酮和多糖的提取及生物活性研究

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为了对药食两用植物果实—苦瓜进行深入开发利用,本项研究对苦瓜黄酮和多糖进行了系列研究,包括苦瓜黄酮和多糖的提取工艺、其系列生物学活性等,具体内容包括以下几个方面:1.超声波辅助提取苦瓜黄酮工艺优化。研究了乙醇浓度、超声功率、提取时间、料液比这四个因素对苦瓜总黄酮得率的影响,采用正交试验设计和统计分析方法确定苦瓜黄酮提取的最佳工艺为:乙醇浓度80%、超声功率70w、提取时间50min、料液比1:35。在此条件下的苦瓜总黄酮最大得率为4.02mg/g。2.苦瓜多糖提取工艺优化。采用水提醇沉法,对苦瓜多糖的提取工艺进行了研究。通过单因素实验和正交实验及统计分析法分别确定了多糖提取最佳工艺为:温度90℃,提取时间是4h,料液比1:40;醇沉的最佳工艺为:提取液浓缩4倍,80%的乙醇,静置6h。3.分别采用Fenton法、邻苯三酚自氧化法和DPPH-法测定苦瓜不同提取物的抗氧化活性。研究结果如下:苦瓜黄酮提取物和苦瓜粗多糖对-OH、02-和DPPH-均有一定的清除能力,尤其是黄酮提取物的清除效果非常显著与阳性对照Vc的效果相当,表明苦瓜中抗氧化活性较强的成分是黄酮类物质。苦瓜黄酮不同溶剂萃取物中水层对·OH、02-·和DPPH-的清除效果最好,正丁醇与乙酸乙酯的清除效果相对较差,说明苦瓜黄酮提取物中抗氧化效果最好的是水层。4.采用MTT法分析了苦瓜黄酮不同溶剂萃取物对人肺癌细胞体外增殖的抑制作用,结果表明不同萃取物对人肺癌细胞A549都有一定的抑制作用,高浓度0.2mg/mL时效果明显,低浓度时效果不显著,浓度为0.002mg/mL时,基本没有抑制作用。其中抑制效果最好的是水层,当培养48h时,对A549的抑制率达48.92%,且抑制作用呈时间—剂量依赖效应。5.通过滤纸片扩散法,打孔法和MIC法进行抑菌活性研究。结果表明,苦瓜黄酮提取物对选取的六种细菌都有一定的抑制效果,其中对枯草芽孢杆菌的抑制效果最好,而苦瓜多糖提取物只对绿脓杆菌和志贺氏菌的抑制效果较好,对其余四种菌则无明显的抑制作用。6.通过建立高脂饲料小鼠模型评价了苦瓜黄酮和多糖提取物的降血脂药理活性。结果显示苦瓜多糖提取物和黄酮提取物均能显著降低高脂血症小鼠血清的TC、TG和LDL-C含量(P<0.05),并使]HDL-C/TC值降低;此外,苦瓜黄酮提取物还能显著降低小鼠肝脏中的TC和TG(P<0.05,P<0.01),但是,苦瓜多糖提取物则对降低肝脏的TC和TG没有明显效果。与高脂模型组相比,苦瓜多糖提取物和黄酮提取物均能能显著降低AI1和AI2(P<0.05)。说明苦瓜黄酮提取物和多糖提取物具有降血脂和预防动脉粥样硬化作用。
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