屎肠球菌BZ2所产细菌素的分离提纯及其初步应用研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:cxr1682000
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为获得具有抑菌效果的天然防腐剂细菌素,本研究通过乙酸乙酯梯度沉淀法和Sephadex G-75凝胶层析法对从内蒙古锡盟地区酸马奶中分离得到屎肠球菌BZ2所产的细菌素进行了分离纯化,并利用屎肠球菌BZ2所产细菌素的粗提物进行了对冷鲜猪肉、羊肉的保鲜效果的研究。实验结果如下:屎肠球菌BZ2所产细菌素的粗提采用与无细胞发酵上清液体积比为1:3的乙酸乙酯梯度沉淀法,得到的屎肠球菌BZ2所产细菌素粗提物的效价为144869 AU/mg,蛋白含量为7.264mg/mL。粗提物经凝胶层析Sephadex G-75进行中度纯化,确定样品上样量为0.7 mL,流速为1.0 mL/min的最佳分离条件。在该条件下回收得到的屎肠球菌BZ2所产细菌素中度提纯物的抑菌效价为1382745 AU/mg。经Tris-Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳检测显示屎肠球菌BZ2所产细菌素粗提物中含有两种蛋白,分子量均处于70-80 kDa之间。屎肠球菌BZ2所产细菌素粗提物在pH 2.0-7.0的范围内,105℃处理30 min后仍然对单核增生李斯特氏菌具有抑菌活性。且屎肠球菌BZ2所产细菌素粗提物对所选的革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌均具有抑菌作用。当屎肠球菌BZ2所产细菌素粗提物添加量为200 g/mL时,冷鲜猪肉的保鲜期与空白对照组相比延长了5天,冷鲜羊肉的保鲜期与空白对照组相比延长了7天,对冷鲜猪肉、羊肉均体现出抑菌保鲜效果。相同保鲜期内屎肠球菌BZ2所产细菌素粗提物添加组的pH值、TVB-N值、菌落总数值均低于同等效价下的Nisin添加组,抑菌效果稍优于Nisin。冷鲜猪肉、羊肉在储藏期内的pH值、TVB-N值、菌落总数均呈上升趋势,但三者在储藏期内变化不完全同步。
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