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目的:外泌体(exosome)是由细胞分泌的一种囊泡样物质,直径在20-200nm,可通过在细胞、组织间传递蛋白及各种遗传物质参与血管生长、细胞增殖、肿瘤细胞侵袭与转移、免疫应答、抗原提呈等多种生理或病理反应,研究发现exosome包含有微小RNA(miRNA),由于exosome所提供的良好保护性,使得外泌体miRNA (exosomal miRNA)在人体液中有很好的稳定性。本研究尝试分析冠心病患者血清中的exosomal miRNA的表达情况,试图找出对冠心病有诊断意义的miRNA。方法:将入院患者依据临床诊断分为急性心梗组(10人)、不稳定心绞痛组(10人)、稳定性心绞痛(10人),并选择健康成人(10人)为对照组,空腹抽取静脉血(心梗患者发病12小时取血)分离出血清,提取exosome,对 exosome进行透射电镜观察和nanosight进行粒径测量以确定提取效果,提取exosomal RNA并测量含量、分子量分布,建立exosomal miRNA的cDNA文库并纯化,对cDNA文库进行鉴定后进行高通量测序,对测序结果进行分析。结果:电镜下观察exosome为囊泡状,大小、分布不均,直径在30-200nm,其外层为脂质包裹,粒径测量结果显示exosome平均粒径129 nm,混悬液浓度8.99×108/ml; Agilent2100测量各样品exosomal RNA在20到30nt处有较高分布,测量纯化后的cDNA峰值在146bp左右,符合miRNA测序要求。测序结果由信息生物学分析显示,41个miRNA文库,与已知miRNA库中相符的niRNA数量分别为AMI组915个、UA组859个、SCAD组775个、Health组822个,各组样品中匀以hsa-miR-451b, hsa-miR-451a、hsa-mir-486-1、hsa-mir-486-2、hsa-miR-486-5p、 hsa-miR-486-3p表达量较多,与对健康对照组相比急性心梗组患者血清exosome中miR-146b-5p表达水平明显升高。小结:通过血清exosome中miR-146b-5p在急性心梗的患者中有明显改变,对诊断一定指导意义。Analysis of expression profiling of serum exosomal microRNA on patients with coronary artery disease