【摘 要】
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玉米雌穗上的籽粒数目由其分化的小花数目决定，实际籽粒数即穗粒数是由正常发育且授粉的小花数决定;而玉米雌花序发育过程中的各类分生组织的启始与分化活性的保持，都影响着雌
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玉米雌穗上的籽粒数目由其分化的小花数目决定，实际籽粒数即穗粒数是由正常发育且授粉的小花数决定;而玉米雌花序发育过程中的各类分生组织的启始与分化活性的保持，都影响着雌性小花分化数目，进而最终影响穗粒数。因此，控制玉米雌花序各类分生组织的启始与分化活性的基因均可能与行粒数的形成密切相关。本课题组前期已获得了一个影响玉米行粒数的基因，该基因编码一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶受体(serine/threonine protein kinase receptor)，暂时命名为ZmSTKR。本研究利用酵母双杂技术筛选与ZmSTKR互作的蛋白，并对筛选到的蛋白及预测的可能互作蛋白利用酵母双杂技术进行点对点验证和双分子荧光互补验证;通过分段杂交确定ZmSTKR功能域;结合以上实验结果解析ZmSTKR作用机理，为深入分析该基因功能、阐明其作用机理奠定基础。主要研究结果如下: 1.以ZmSKTR为诱饵蛋白筛选酵母双杂文库，经序列分析共得到105条可用序列。其中，20条序列编码跨膜运输相关的蛋白，占19％;核糖体蛋白（2个核糖体大亚基蛋白，16个核糖体小亚基蛋白）和热激蛋白的编码序列分别有18和15条，分别占17.1％和14.3％;蛋白激酶和蛋白磷酸解相关的蛋白编码序列分别为4条和2条;泛素连接酶编码序列3条。去除冗余序列，共获得64个UniGene基因。 2.基于ZmSTKR与玉米行粒数相关的假说，本实验分析了10个花序发育相关蛋白(TE1，LG2，ZmPIN1，FEA2，BIF2，TB1，BD1，BA1，DLF1，KN1)与ZmSTKR互作关系，发现LG2和TB1分别与ZmSTKR存在蛋白质互作。文库筛选所得其它互作蛋白的验证尚在进行中。 3.经过双分子荧光互补实验证明LG2能够与ZmSTKR真实互作，TB1在酵母双杂中的假阳性经进一步验证是因为其本身具有自激活活性。 4.分段杂交实验显示，ZmSTKR的各个片段均不能与LG2发生互作，说明只有完整的ZmSTKR蛋白才能发挥与LG2互作的可能。
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