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背景和目的： 视网膜色素变性（Retinitis pigmentosa，RP）是最一种最常见的遗传性视网膜疾病，也是主要的致盲性疾病，目前临床尚无有效的治疗办法。在目前研究治疗视网膜变性疾病的方法中，细胞移植被认为是最有潜力的治疗手段。在帕金森等神经系统变性疾病中，嗅鞘细胞（OECs）与神经干细胞（NSCs）表现出较单一移植一种细胞更好的功能修复作用。视网膜色度变性与神经系统变性过程有许多相似性之处。在本研究中，我们以 RCS变性大鼠为模型，研究OECs+NSCs联合移植能否更好的恢复变性视网膜的视功能，为将来治疗视网膜变性疾病探寻一条可行的治疗途径。 方法： 1.建立 Transwell体外共培养体系以模拟视网膜下腔环境，探究 OECs对NSCs迁徙能力的影响。 2.建立Transwell体外共培养体系，探究在有血清环境中OECs对NSCs和定向分化命运的影响。 3. OEC+NSC联合移植缓解视网膜色变性进程的实验研究 （1）原代分离、培养OECs和NSCs，观察并鉴定细胞生物学特性。 （2）选取28天龄（P28d）的RCS变性鼠行视网膜下腔细胞联合移植，分别于移植后4周（P63d）、8周（P63d）、12周（P119d）进行以下检测：暗适应F-ERG、外核层厚度测量、移植后视网膜组织免疫荧光检测和Western Blot定量蛋白分析。 结果： 1.体外共培养体系研究OECs对NSCs迁徙能力和定向分化命运的影响。 （1）在离体模拟视网膜下腔环境中，OECs+NSCs联合实验组在视网膜内广泛迁移，对照组NSCs停留在移植原处。表明OECs能有效增强NSCs的迁移能力。 （2）在有血清共培养体系中，与OECs共培养后NSCs的Pax6、Sox2阳性细胞率高于对照组，GFAP表达低于对照组；Brdu阳性细胞率和对照组没有统计学差异。结果显示，OECs促进NSCs向神经前体细胞方向分化，抑制其向胶质前体细胞方向分化；OECs对NSCs的增殖未见明显影响。 2. OECs+NSCs联合移植增强缓解视网膜色变性进程的作用 （1）移植的OECs、NSCs均可在RCS变性大鼠视网膜内存活至术后12w（P119d）；移植细胞可在视网膜下腔和视网膜内层迁徙，在术后8w时 OECs能够帮助NSCs在视网膜下腔迁徙，为改善RCS变性大鼠的视功能奠定了基础。 （2）OECs+NSCs联合移植挽救RCS变性大鼠视功能： a. OECs+NSCs联合移植组在术后4w（P63d）时暗适应F-ERG的b波幅值相对于其他组显著增高。 b.外核层厚度测量结果显示在术后4w（P63d）至12w（P119d）OECs+NSCs联合移植组外核层细胞均显著增厚。 （3） OECs+NSCs联合移植挽救RCS变性大鼠视功能可能的机制： a. OECs+NSCs联合后视网膜内核层及以内的Sox2阳性细胞显著增加，这种优势一直持续到术后8w（P91d）。 b.术后各细胞移植组未查见有DiI和Recoverin双标的细胞，说明到移植的OECs或NSCs未能有效转化为感光前体细胞。 c.单独OECs移植组和单独NSCs移植组分别于术后4w（P63d）和术后8w（P91d）先后表现显著的抑制 Müller细胞胶质化的作用，相应的 WB显示GFAP表达量降低。OECs+NSCs联合移植组Müller细胞胶质化情况及GFAP表达量介于二者之间。 结论： 1.本次研究成功的设计了两种Transwell共培养体系，揭示了：在模拟视网膜下腔环境中，OECs能有效增强NSCs的迁移能力；在有血清共培养体系中， OECs促进NSCs向神经前体细胞方向分化，抑制其向胶质前体细胞方向分化。为在体联合移植OECs和NSCs治疗视网膜变性大鼠提供了依据。 2.本课题率先进行了OECs和NSCs联合移植治疗RCS变性大鼠的研究。并证实联合移植的OECs和NSCs均可在RCS变性大鼠视网膜内存活至少到12w（P119d）；OECs能够增强NSCs在视网膜下腔的迁徙能力，为改善RCS变性大鼠的视功能奠定了基础。 3.本研究首次发现：OECs+NSCs联合移植可以更好的改善 RCS变性大鼠的视功能，更有效的保护视网膜感光细胞，延缓病情发展。 4. OECs+NSCs联合移植能够激活更多的内源性干细胞，抑制RCS变性鼠视网膜内胶质瘢痕形成，可能是联合移植改善视功能的机制之一。尚未见文献报道。