【摘 要】
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目的:通过观察负压封闭引流治疗组(VSD治疗组)和空白对照组在创面愈合过程中Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的表达水平和Ⅰ/Ⅲ型胶原比例的变化,探讨负压封闭引流技术促进创面愈
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目的:通过观察负压封闭引流治疗组(VSD治疗组)和空白对照组在创面愈合过程中Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的表达水平和Ⅰ/Ⅲ型胶原比例的变化,探讨负压封闭引流技术促进创面愈合的潜在机制。方法:1、取健康雄性SD大鼠36只,建立大鼠背部皮肤全层缺损模型,圆形创面,直径20毫米。2、建立创面模型以后随机分为VSD治疗组和空白对照组,每组18只,空白对照组给予换药后纱布覆盖,VSD治疗组给予负压封闭引流治疗,负压值-125mmHg;根据处死时间分为1天、3天、7天组,每组6只。3、术后第1天、3天、7天对创面进行固定高度连续拍照,观察创面愈合情况和计算比较创面愈合率变化情况。4、实时荧光定量PCR检测两组术后第1天、3天、7天肉芽组织的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的mRNA表达水平变化。5、免疫组化分析术后第1天、3天、7天肉芽组织的Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的表达水平变化及Ⅰ/Ⅲ胶原比例变化。6、天狼猩红染色后,偏振光显微镜下分析肉芽组织Ⅰ/Ⅲ胶原比例变化。7、H&E染色观察肉芽组织再生情况。8、Masson三色染色观察创面肉芽组织胶原排列分布和创面再上皮化长度的变化。结果:1、创面连续拍照结果显示:在创面愈合过程中,空白对照组创面干燥结痂,而VSD治疗组创面较湿润。创面愈合率显示,从术后第1天开始VSD治疗组的创面愈合率就明显高于空白对照组(P<0.05),这一显著差异持续到术后第7天。2、实时荧光定量PCR结果显示:与空白对照组相比较,在术后第1天,3天,7天,VSD治疗组Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的mRNA表达水平均提高,存在统计学差异(P<0.05)。3、免疫组织化学结果显示(用平均光密度值表示蛋白的表达水平):与空白对照组相比较,在术后第1天,3天,7天,VSD治疗组Ⅰ型胶原蛋白表达水平均提高,存在统计学差异(P<0.05)。与空白对照组相比较,在术后第1天,VSD治疗组Ⅲ型胶原蛋白表达水平提高,存在统计学差异(P<0.05);在术后第3天和第7天,两组Ⅲ型胶原蛋白表达水平未见明显差异。与空白对照组相比较,在术后第3天和第7天,VSD治疗组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例均提高,存在统计学差异(P<0.05)。4、天狼猩红染色后偏振光显微镜下分析Ⅰ/Ⅲ型胶原比例,结果显示:与空白对照组相比较,在术后第3天和第7天,VSD治疗组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例均提高,存在统计学差异(P<0.05)。5、H&E染色结果显示:在术后第1天,VSD治疗组肉芽组织面积高于空白对照组,存在统计学差异(P<0.05);在术后第3天,两组肉芽组织面积未见明显统计学差异;术后第7天,VSD治疗组肉芽组织面积低于空白对照组,存在统计学差异(P<0.05)。6、Masson三色染色结果显示:术后第7天,VSD治疗组创面再上皮化速度快于空白对照组,存在统计学差异(P<0.05)。结论:1.负压封闭引流技术可以促进大鼠急性皮肤创面的愈合。2.负压封闭引流技术可以提升创面愈合过程中Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的表达量以及提升Ⅰ/Ⅲ型胶原比例。
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