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目的: 大鼠的双侧颈总动脉结扎(occlusion of bilateral common carotid arteries,2VO)模型可导致慢性脑缺血,从而引起认知功能损伤及血管性痴呆。目前已有研究证明,肢体远程缺血后适应(limb remote ischemic postconditioning,LRIP)能够减轻一过性脑缺血造成的缺血再灌注(ischemic/reperfusion,I/R)损伤,缓解神经功能缺损,抑制神经元凋亡。本次实验的目的是评估反复实施的LRIP对于长期慢性脑缺血(2VO)导致的认知功能缺损的作用。 方法: (1)将雄性SD大鼠随机分为3组:2VO组作为缺血对照组、2VO+LRIP组作为实验组、假手术(sham)组,从2VO术后3天开始,对2VO+LRIP组大鼠进行双侧股动脉10min压闭/10min释放的LRIP,每天持续3个循环。 (2)在LRIP进行4周和6周后对3组大鼠进行Morris水迷宫实验,记录逃避潜伏期和目标象限停留时间百分比,以检测大鼠的空间记忆与学习能力。 (3)在海马CA3-CA1通路长时程增强(long-term potentiation,LTP)实验中,记录场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP)并计算fEPSP斜率,以测量海马区突触传递效能。 (4)在免疫组化实验中,研究了大鼠海马CA1区神经再生情况。连续3天对各组大鼠腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)以标记新生的神经元,计数BrdU阳性细胞。 结果: (1)水迷宫实验:LRIP进行4周后,与2VO组相比,sham组(p<0.01)及2VO+LRIP组(p<0.05)的逃避潜伏期均明显缩短。sham组比2VO组的目标象限停留时间百分比明显增加(P<0.05),而2VO组与2VO+LRIP组无明显差异。LRIP进行6周后,与2VO组相比,sham组(p<0.01)以及2VO+LRIP组(p<0.05)的逃避潜伏期均明显缩短。2VO组大鼠的目标象限停留时间百分比相较于sham组明显缩短(p<0.01),而2VO+LRIP组相较于2VO组明显增加(p<0.01)。 (2)LTP研究:2VO组较sham组fEPSP斜率明显下降(p<0.01),2VO+LRIP组的fEPSP斜率下降较2VO组有明显改善(p<0.01)。 (3)BrdU+细胞计数:2VO组较sham组BrdU+细胞数明显减少(p<0.01),2VO+LRIP组较2VO组BrdU+细胞数明显增多(p<0.01)。 结论: 2VO术后对大鼠进行6周的反复实施的LRIP,能够明显缓解2VO大鼠空间记忆与认知功能的损伤,并显著改善了海马区LTP的抑制。LRIP还促进了海马CA1区的神经再生,这可能是LRIP对于脑缺血具有神经保护作用的机制之一。