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目的:雷公藤红素是雷公藤的主要活性单体之一,其药理活性显著而广泛。目前为止,国内外关于雷公藤红素对糖尿病肾脏损伤的作用研究较少。本课题从动物整体水平,评价雷公藤红素对糖尿病大鼠的肾脏保护作用,检测MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平,旨在进一步探讨雷公藤红素防治糖尿病肾病可能的作用机制。方法:健康雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组(NC组,n=8)和预造模组。造模前禁食不禁水12h,给予配制好的1%STZ 50mg/kg一次性腹腔注射,正常组给予腹腔注射等量柠檬酸缓冲液。所有大鼠在动物房内用代谢笼分笼饲养,自由饮食。成模大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组),雷公藤红素低剂量干预组(DM+CL组,50ug/kg),雷公藤红素高剂量干预组(DM+CH组,100ug/kg),雷公藤多苷干预组(DM+T组,8mg/kg),MAPK/NF-κB抑制剂干预组(DM+INH组)。干预4周后处死取材,检测血糖、肾功能、24 h尿量及尿微量白蛋白(mALB)等指标,测量大鼠体重(BW)、肾重(RW)、肝重(LW),计算肾脏指数、肝脏指数,HE染色光学显微镜下观察各组大鼠肾组织和肝组织病理形态学改变;ELISA法检测各组大鼠血清炎症因子IL-8、FN和PAI-1浓度水平;应用免疫组织化学技术和Western Blot技术观察各组大鼠肾组织p38MAPK和NF-κB p65蛋白的表达。结果:1.一般指标:(1)生化指标:与NC组相比,DM组大鼠血糖、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24h尿量、24尿微量白蛋白均明显升高(P<0.05);与DM组相比,各给药组大鼠血糖差异无显著性(P>0.05);红素高剂量组、多苷组及抑制剂组BUN水平均有明显下降(P<0.05);红素不同剂量组、多苷组、抑制剂组血清Scr、24h尿量和尿微量白蛋白水平明显下降(P<0.05)。(2)体重、肾脏指数(RW/BW)和肝脏指数(LW/BW):与NC组相比,DM组大鼠体重明显低于NC组,其差异具有显著性(P<0.05);红素低剂量组体重明显减轻,差异具有统计学意义(P<0.05),红素高剂量组、多苷组及抑制剂干预组体重变化均无显著性差异(P>0.05)。与NC组相比,DM组大鼠RW/BW、LW/BW无明显升高(P>0.05),各给药组RW/BW、LW/BW较DM组均无明显变化(P>0.05)。2.雷公藤红素对糖尿病大鼠肾组织和肝组织病理形态学的影响:(1)肾脏H&E染色显示:NC组大鼠肾小球大小一致、结构清晰,系膜细胞及内皮细胞未见增多;DM组肾小球体积增大,肾小球毛细血管丛呈分叶状,肾小球基底膜轻度增厚,系膜基质轻度增多;红素不同剂量干预组、多苷组和抑制剂组有不同程度减轻,DM+CH组改善最明显。(2)肝脏H&E染色显示:NC组大鼠肝小叶结构完整、清晰,肝细胞大小形态正常,无炎性细胞浸润;DM组肝小叶结构轮廓大致消失,肝细胞排列紊乱,肿胀呈弥漫性大泡样脂肪变性,汇管区可见炎性细胞浸润;红素不同剂量干预组和多苷组有不同程度减轻,DM+CH组改善最明显。3.雷公藤红素对糖尿病大鼠血清中炎性因子水平的影响:与NC组相比,DM组FN、IL-8和PAI-1水平明显升高,差异具有显著性(P<0.01)。与DM组相比,红素不同剂量组和多苷组FN水平明显下降(P<0.05);抑制剂组IL-8水平明显下降(P<0.05);各干预组PAI-1水平均有下降(P<0.05)。4.雷公藤红素对糖尿病大鼠肾组织MAPK/NF-κB免疫炎症信号通路的影响:与NC组相比,DM组大鼠肾组织p38MAPK、NF-κBp65蛋白表达均明显增加(P<0.05);与DM组相比,红素高剂量组p38MAPK、NF-κBp65表达明显降低(P<0.05)。结论:1.采用腹腔注射STZ可以成功制备糖尿病大鼠模型,MAPK/NF-κB信号通路参与糖尿病肾脏损伤过程,可作为干预治疗靶点之一。2.雷公藤红素能够减轻糖尿病大鼠肾脏损伤,其作用机制与调控MAPK/NF-κB信号通路有关。