【摘 要】
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稻瘟病是世界各地的水稻种植区最严重的病害之一。化学农药在防治过程中长期及大量的使用，导致了严重的食品安全和环境安全问题，受到了人们的广泛关注。因此，开发微生物源农药防
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稻瘟病是世界各地的水稻种植区最严重的病害之一。化学农药在防治过程中长期及大量的使用，导致了严重的食品安全和环境安全问题，受到了人们的广泛关注。因此，开发微生物源农药防治稻瘟病十分重要。随着越来越多的海洋微生物的发现，人们开始着眼于独特生存环境的海洋微生物，发现了许多结构特异、新颖的新型化合物，所以从海洋中开发新型活性物质已成为各国科学家当前研究的热点。本试验旨在从海洋中分离并筛选出对水稻稻瘟病菌有较强拮抗作用的海洋微生物，并对菌株分类鉴定、发酵条件的优化及其抑菌物质等作研究，以期为生物防治稻瘟病菌提供新型微生物农药资源。通过平板稀释法分离得到184株菌。以稻瘟病菌815为指示病原菌，采用牛津杯法对分离获得的菌株进行初步筛选，结果发现，有拮抗作用的海洋细菌有9株。采用平板对峙法对获得的9株菌进行抗性复筛，发现HW-14菌株抑菌效果最明显，而且对其他稻瘟病菌生理小种都有抑菌活性，且抑菌圈直径都在18mm以上。采用平板对峙法对禾谷病（Fusarium graminearum Schw.）、玉米大斑病（Exerohilum turcicum）、尖刀镰孢菌（F. oxysporum f.sp.Vasinfectum）、烟草黑胫病（Phytophthora nicotianae）拮抗实验，结果表明，HW-14菌株对上述几种病原真菌均有一定的抑制效果。通过对HW-14菌株形态的观察、生理生化特征及16S rDNA同源性序列分析，鉴定其为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。通过单因子试验，对HW-14菌株的培养条件进行优化。试验结果表明，HW-14菌株最佳发酵条件为：发酵温度30℃，培养基初始pH值为7.0，发酵时间为72h，接种量为6%，250mL发酵摇瓶装液量为80mL，摇床培养振荡转速为180r/min。光学和扫描电子显微镜观察表明，HW-14菌株代谢产物促使稻瘟病菌菌丝畸形，菌丝中间及顶端出现膨大或膨大成泡囊状，菌丝扭曲，变得粗细不均匀。通过硫酸铵盐析法和等电点法及平板对扣试验进一步研究表明，饱和度30%硫酸铵沉淀和酸沉淀物质及挥发性气体化合物对稻瘟病菌都有的抑菌效果，但酸沉淀物质和挥发性气体化合物抑菌效果较明显。
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