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目的:通过检测干扰Notch1基因后Sup T1细胞的增殖、凋亡和Notch1受体基因及其下游靶基因表达水平的变化,探讨Notch信号通路与急性T淋巴细胞白血病发生、发展的关系。在下调Notch1基因后的Sup T1细胞中加入1ng/μl硼替佐米,检测对Sup T1细胞增殖、凋亡和Notch1受体基因及其下游靶基因表达水平的变化,探讨Notch1基因表达对硼替佐米敏感性的影响。方法:1.利用携带Notch1特异性和非特异性sh RNA的慢病毒载体包装成病毒颗粒感染Sup T1细胞,选取干扰效率高的感染细胞作为干扰组,分别于48、72、96个小时后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖率;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率(Annexin V+/7-AAD-和Annexin V+/7-AAD+);采用实时荧光定量PCR法检测Notch1受体基因及下游靶基因基因Hes1、NF-κB、c-myc的m RNA表达水平。2.在感染Sup T1细胞后,分别在第24、48、72小时三个不同时间点加入1ng/μl硼替佐米继续孵育24小时后,采用CCK-8法、流式细胞术、实时荧光定量PCR法检测其在干扰Notch1基因后第48、72、96小时二者共同作用对Sup T1细胞增殖、凋亡及Notch1受体基因及下游靶基因基因Hes1、NF-κB、c-myc的m RNA表达水平的影响。结果:1.Notch1干扰组细胞的增殖较空白对照组、空载体组明显降低,细胞抑制率较空白对照组、空载体组明显升高(P均<0.05),且细胞增殖的抑制作用呈时间依赖性。2.干扰组Annexin V-PE+/7-AAD-较空白对照组、空载体组明显升高(P均<0.05);而各组细胞Annexin V-PE+/7-AAD+无明显变化(P>0.05)。3.干扰组细胞中Notch1受体基因及其下游靶基因Hes1、c-myc、NF-κB表达较空白对照组及空载体组显著降低(P均<0.05)。4.硼替佐米对Sup T1细胞的增殖有明显的抑制作用,且抑制作用呈浓度和时间依赖性;干扰加药组、空载加药组细胞抑制率均高于干扰组、空载体组(P均<0.05)。5.干扰加药组细胞Annexin V-PE+/7-AAD-较空白对照组及空载体组明显升高(P均<0.05);各组细胞Annexin V-PE+/7-AAD+细胞差异均无统计学意义(P>0.05)。6.干扰加药组下游基因表达水平较干扰组明显降低(P<0.05),且干扰组及干扰加药组的基因Notch1、Hes1、c-myc、NF-κB表达抑制呈时间依赖性。结论:1.特异性Notch1-sh RNA-4252可有效下调Notch1 m RNA的表达,并降低下游靶基因水平的表达;2.Notchl表达下调可以抑制Sup T1细胞增殖,且细胞抑制作用呈时间依赖性;促进Sup T1细胞的早期凋亡。3.sh RNA干扰后硼替佐米对Sup T1细胞增殖抑制、凋亡、Notch1受体基因及下游靶基因抑制更加明显,特异性sh RNA干扰Notchl基因与硼替佐米呈叠加作用。