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目的:探讨蔡氏育肾培元方对卵巢低反应患者临床疗效和蔡氏育肾培元方对低反应患者卵巢颗粒细胞基因表达及分泌功能的影响。 方法:本研究分临床和基础两部分。临床部分为前瞻性队列研究，治疗组选取111名患者，给予育肾培元方治疗3个月并继续服用至拮抗剂方案超促排取卯前一日。对照组89名患者，不服用药物，三月后再次拮抗剂方案超促排。以获卵数为主要指标，以两组患者FSH，AMH，AFC同一时间点的变化以及每组患者不同时间点的变化趋势，两组Gn总剂量，Gn用药天数，受精卵数，hCG日血E2水平、hCG日直径≥18mm卵泡数、子宫内膜厚度，优质胚胎数，鲜胚移植数，周期取消率以及临床妊娠率等作为次要指标进行观察。基础研究部分:选取治疗组3例，对照组3例的两次取卵的卵巢颗粒细胞进行RNA-seq测序，并对相关差异基因进行qPCR和免疫印迹验证。同时对颗粒细胞进行分离培养，检测两组颗粒细胞的生长及分泌功能。 结果:1.对卵巢储备功能的影响:1)AFC:本临床研究中发现:治疗8周治疗组较对照组相比，AFC数目增多，差异有统计学意义(P＜0.05);治疗12周治疗组较对照组相比，AFC数目增多，差异有统计学意义(P＜0.05)。治疗组内AFC数目在4周、8周、12周时都比0周时增多，差异有统计学意义(P＜0.05)。2)AMH:治疗组用药12周后AMH较治疗前升高趋势，但与对照组相比，差异没有统计学意义(P＞0.05)。治疗组的AMH在8周，12周时都比0周时显著增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。3)FSH:治疗组用药12周后FSH较治疗前呈下降趋势，但与对照组相比差异没有统计学意义(P＞0.05)。治疗组的FSH在4周、8周、12周时都比0周时显著增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。2.两组患者用药后临床疗效比较:治疗组的获卵数及优质胚胎数都较对照组显著增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。Gn药量和Gn用药时间、hCG日直径≥18mm卵泡数、hCG日子宫内膜厚度，受精卵数，鲜胚移植数，周期取消率，两组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。治疗组临床妊娠率与对照组相比有所增加，但差异无统计学意(P＞0.05)。3.RNA-seq测序:我们发现对照组颗粒细胞第二次取卯时的部分基因表达与第一次有明显差异。对照组患者三个月后第二次取卵表达上调的差异基因大部分集中在免疫应答、应激反应及细胞凋亡等生物学功能之中。而药物治疗组患者的颗粒细胞在药物治疗三个月后表达上调的相关基因主要富集于免疫应答、细胞活化和细胞粘附等功能。进一步的比对发现相比对照组，药物治疗组第二次取卵时上调的免疫应激基因的数量显著降低。通过进一步的基因富集分析表明，治疗组卵巢颗粒细胞基因表达模式与对照组有很多不同。在卵巢相关基因及卵泡发育相关基因的表达模式上，治疗三个月后的卵巢颗粒细胞的卵泡发育相关基因及卵巢相关基因明显上调。通过对部分差异显著基因:一些上调基因，PTPN6、CYBA、FOS、ITGB7等;以及一些下调基因，IL1B，TNFAIP3的qPCR验证结果显示这些基因的表达模式与RNA测序结果较为一致。在表达上调基因中，发现部分基因与卵巢功能密切相关。如FOS和PTPN6基因。免疫印迹结果显示育肾培元方改善了PTPN6、CYBA、ITGB7及IL1B基因在颗粒细胞中的表达模式。细胞实验证实对照组颗粒细胞在体外培养过程中细胞贴壁能力较差，细胞活力较低，细胞突触不发达。而中药治疗组颗粒细胞在体外培养过程中细胞贴壁能力较强，细胞突触发达且细胞增殖速度较快。进一步研究显示治疗组的颗粒细胞分泌的E2和P都显著高于对照组(P＜0.05)。说明育肾培元方的治疗可以调节颗粒细胞的分泌功能。 结论:育肾培元方可以增加卵巢低反应患者AFC，增加拮抗剂方案促排下的获卵数、优质胚胎数。降低了卵巢低反应患者的免疫应激反应，改善卵巢颗粒细胞卵巢及卵泡发育相关基因的表达模式，增强卵巢细胞的生长活性及分泌功能，从而改善了卵巢低反应患者促排治疗的卵巢反应性，改善试管的预后。