铁皮石斛抗炭疽病种质资源筛选及抗性株系制种和应用

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铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo),兰科石斛属,我国传统名贵中药材,有滋阴清热、润肺明目、抗癌防老等功效,市场需求日益增加,而野生资源己濒临灭绝,因此人工栽培面积逐年上升。2014年,全国人工种植面积突破50000多亩。随着设施栽培规模的扩大,铁皮石斛病虫害逐年严重。经调查,铁皮石斛叶部病害尤为严重,其中由胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的叶片炭疽病更为普遍。为此本文对铁皮石斛的田间病害、抗性种源筛选及抗性株系制种和应用等方面进行了研究,具体结果如下:1、铁皮石斛主产区病害调研,发现各基地的叶部病害多为炭疽病,主要症状表现为感染初期病叶的表面呈黑色针点状,随后病斑逐渐扩大,叶片中部呈淡褐色或灰白色,而边缘呈紫褐色或暗褐色的近圆形凹陷病斑,发病严重时整张叶片变枯黑最后脱落。2、通过铁皮石斛炭疽病病害样本的采集和病原分离,以及形态学和分子生物学鉴定,鉴定出炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。3、对本实验室选育的铁皮石斛ZJU系列株系,进行炭疽病抗病种源的筛选。获得了3个抗性较强的株系,分别为ZJU-1、ZJU-2 和 ZJU-4。4、对高抗种源ZJU-4株系进行花器官发育分析,采用TTC (2,3,5—氯化三苯基四氮唑)染色法和联苯胺过-氧化氢法测定铁皮石斛不同花期的花药活力和柱头可授性。研究结果表明,花药与柱头发育不同步。开花8-14 d的花药和开花8-21d柱头组合,座果率高达96.67%。5、探索铁皮石斛原球茎(PLBs)诱导、增殖的培养条件。结果表明,原球茎的最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+土豆100 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L,诱导率为19%;液体培养的最佳接种密度为1 g/50ml,原球茎的增殖率高达108%。
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