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[目的]： 1.研究沉默信息调节子1(silent information regulator1，SIRT1)在氢醌(hydroquinone，HQ)短期处理人淋巴母细胞TK6细胞后所产生的生物学效应及其与肿瘤相关基因表达变化的联系。 2.探讨SIRT1在HQ长期诱导细胞恶性转化中的作用。 [方法]： 1.应用慢病毒介导的RNA干扰技术构建TK6细胞的SIRT1缺陷细胞株(TK6-shSIRT1)，并用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time ploymerasechain reaction，qRT-PCR)和免疫印迹法(western blotting，WB)联合鉴定干扰效果，比较两种细胞的一般生物学特性（细胞形态、细胞增殖能力和细胞周期分布）。 2.用不同剂量HQ分别染毒TK6和TK6-shSIRT1细胞48 h，以磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline，PBS)为溶剂对照组。检测并比较两种细胞存活率、细胞周期分布和细胞凋亡情况。 3.用20.0μM HQ染毒TK6细胞24 h，每周一次，通过生长速度、侵袭能力和裸鼠皮下成瘤能力鉴定细胞的恶性表型;瘤块常规病理切片HE染色检查，并用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中K-ras、P53、PARP-1和SIRT1的表达情况。 4.用qRT-PCR和WB分别检测SIRT1，PARP-1，Bcl-2，P53，K-ras和乙酰化组蛋白3(acH3)在HQ短期处理的细胞和长期诱导转化的细胞中mRNA或（和）蛋白水平的表达情况。 5.统计分析:应用统计软件SPSS15.0对各项指标进行统计学分析。计量资料用(x)±s表示，组间计量资料比较采用t检验或单因素方差分析;计数资料用率或构成比表示，组间计数资料比较采用卡方检验。以α=0.05为检验水准;P≤0.05时差异有统计学意义。 [结果]： 1.成功筛选出稳定表达的人淋巴母细胞SIRT1缺陷细胞株;与TK6正常细胞株相比，TK6-shSIRT1细胞中SIRT1基因在mRNA和蛋白表达水平分别下降了84.6％和94.5％，且生长速度加快了6.57 h，增殖指数增加了11.8％，但细胞形态未出现明显改变。 2.经HQ短时间处理后:两种细胞存活率均呈剂量依赖性降低;相同染毒剂量条件下，TK6-shSIRT1细胞的存活率均明显低于TK6细胞。与PBS对照组相比，HQ处理48 h后，TK6细胞在10、20和40μM HQ处理时发生G1期阻滞;与PBS对照组相比，TK6-shSIRT1细胞在20μM HQ处理时发生S期阻滞，40μMHQ处理时发生G1期阻滞。与TK6正常细胞株相比，TK6-shSIRT1细胞在10、20和40μM HQ处理时，G1期细胞比例减少，而S期细胞比例显著增加。每个剂量HQ处理时，TK6-shSIRT1细胞比TK6细胞早期凋亡率高。正常TK6细胞中sirt1、p53和k-ras基因表达下调，parp-1和bcl-2表达量未见显著变化;TK6-shSIRT1细胞中parp-1基因下调，bcl-2、p53和k-ras基因表达上调。 3.TK6细胞经HQ诱导19周后生长速度是对照组的1.82倍，金属基质蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，mmp-9) mRNA水平表达量是对照组的13.11倍，并且HQ转化细胞在裸鼠皮下接种后形成肿瘤。瘤块病理切片HE染色:移植瘤细胞密集，呈实性团块、巢状或索条状排列，间隔以少量间质，可见肿瘤血管;细胞核大深染，细胞质呈现出深浅不同的红色。免疫组织化学检测出人K-ras、P53、PARP-1和SIRT1蛋白阳性细胞比例分别为67.8％，11.8％，43.2％和15.1％。 4.HQ诱发TK6细胞恶性转化过程中，SIRT1和K-ras表达显著上调，Caspase-3、P53和acH3水平降低，PARP-1表达量变化不明显。 [结论]： 1.成功构建稳定的人淋巴母细胞SIRT1缺陷细胞株。 2.SIRT1缺陷可增加TK6细胞对HQ的敏感性。 3.成功建立HQ诱导的TK6细胞恶性转化模型。 4.SIRT1可能通过介导癌基因K-ras的激活、抑癌基因P53的失活和组蛋白H3的去乙酰化而在HQ诱导人淋巴母细胞恶性转化中起重要作用。