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海参、可口革囊星虫和普通小球藻都是蛋白质含量丰富的营养食品，是食源性功能肽的良好来源。二肽基肽酶-Ⅳ(DPP-Ⅳ)在调节体内血糖稳定的过程中起着非常重要的作用，通过抑制DPP-Ⅳ活性可以降低Ⅱ型糖尿病患者体内的血糖水平。本课题以海参、可口革囊星虫和普通小球藻为原料，开展了筛选DPP-Ⅳ抑制肽的工作，主要包括: 1.对海参的酶水解条件进行了探索，通过单因素和正交实验对水解条件进行优化，确定的水解条件为反应温度为55℃，反应时间10h，加酶量为1200 U/g湿海参。经过水解条件的优化，DPP-Ⅳ抑制率提高到64.5％。海参酶解液去除多糖之后，经3 kDa和5 kDa的超滤管分离、葡聚糖凝胶G-15过滤层析串联G-10和反相高效液相色谱分离，最终DPP-Ⅳ抑制活性较高的组分用MALDI-TOF/TOF分析，鉴定出两条多肽，分别为IKYPIEHA和LRGPM，它们的IC50值分别为5.05 mM和8.01 mM。 2.可口革囊星虫采用模拟胃肠道消化液水解后，其水解度为25±2.2％，水解产物配成浓度为10 mg/mL的溶液其DPP-Ⅳ抑制率为55％。可口革囊星虫经胃胰酶水解后依次通过3 kDa的超滤管分离、葡聚糖凝胶G-25和葡聚糖凝胶G-15过滤层析、反相高效液相色谱分离，最终得到具有较高DPP-Ⅳ抑制抑制活性的组分F2-3。组分F2-3进行MALDI-TOF/TOF分析得到一个主要的质子峰，分子量为910 Da，多肽的氨基酸序列为SREPTHPS，其抑制DPP-Ⅳ的IC50值为5.7 mM。 3.利用BIOPEP软件，将普通小球藻蛋白用胃蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶虚拟水解，共得到468种二肽和三肽，占多肽总数的39％左右，建立普通小球藻二肽和三肽库;统计普通小球藻的二肽和三肽的C端和N端氨基酸的种类和百分比;通过分子对接从468条二肽和三肽筛选ACE抑制肽，其中TTW和VHW显示出较强的ACE抑制活性，其IC50分别为0.61±0.003μM和0.91±0.003μM。从普通小球藻的二肽和三肽库中在挑选出来的6个具有DPP-Ⅳ抑制活性的三肽中，VPW是DPP-Ⅳ抑制活性最好的多肽，其IC50值为348.6±20.24μM，且具有ACE抑制活性，其IC50值为382.9±17.8μM。筛选出的具有高活性的ACE和DPP-Ⅳ抑制肽的消化稳定性较高，不会被消化道蛋白酶进一步水解。最后，通过计算生物学利用分子模拟的方法研究多肽与ACE、多肽与DPP-Ⅳ的抑制机理。