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本课题为2015年版《中国药典》科研任务:特征图谱在中药材和饮片及中成药质量控制中的应用。旨在建立龙胆药材特征图谱，制备龙胆对照提取物，以期达到快捷、简便地鉴别龙胆药材、饮片及含龙胆中药复方制剂中龙胆药材的目的。以龙胆为研究对象，分别进行了龙胆药材特征图谱研究，龙胆对照提取物制备工艺研究、质量控制研究及龙胆对照提取物在龙胆药材、饮片及含龙胆中药复方制剂中的应用研究。同时，对不同厂家龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、栀子苷、黄芩苷的体外溶出度进行了比较研究。 一、龙胆药材特征图谱的研究 龙胆中的大极性成分含量很高，中等及小极性成分含量很低。本试验首先采用水提取，然后采用乙酸乙酯萃取，制备供试品溶液。在保留部分大极性成分的基础上，富集中等及小极性成分，以期全面地表征龙胆药材的特征。分别建立了龙胆与坚龙胆药材的HPLC指纹图谱。通过相似度分析对指纹图谱进行评价。在龙胆药材指纹图谱的基础上，建立了具有5个特征峰的龙胆药材特征图谱。在坚龙胆药材指纹图谱的基础上，建立了具有5个特征峰的坚龙胆药材特征图谱。通过聚类分析、主成分分析对龙胆、坚龙胆药材特征图谱进行评价。采用LC-MS并结合文献报道对特征峰进行了初步推断。探究了龙胆药材特征图谱在不同龙胆的鉴别中的应用。 相似度分析结果显示，21批龙胆与坚龙胆样品的整体相似度为0.29-0.95。7批龙胆样品中，除S4外，其余样品的整体相似度为0.82-0.99。14批坚龙胆样品整体相似度为0.75-0.99，其中10批样品相似度大于0.90。聚类分析中，样品聚为3类:S4、龙胆、坚龙胆。主成分分析中，21批次的龙胆和坚龙胆样品清晰地分为两类，其中S4与其余批次龙胆样品相距较远。采用聚类分析、主成分分析对数据进行统计，发现龙胆/坚龙胆药材特征图谱能够有效地鉴别龙胆、坚龙胆。 二、龙胆对照提取物的研究 制备龙胆对照提取物，以期达到快捷、简便地鉴别龙胆药材、饮片及含龙胆中药复方制剂的目的。对龙胆对照提取物的制备工艺及质量控制方法进行了研究，并探究了龙胆对照提取物在龙胆药材、饮片及含龙胆中药复方制剂中的应用。 以龙胆为研究对象，以龙胆指纹图谱中的5个特征峰的相对峰面积为评价指标，采用L9(34)正交试验，优化龙胆对照提取物的制备工艺。确定最佳制备工艺为:药材最粗粉加10倍量水，回流提取3次，每次1h，获得水提液;将水提液浓缩至原药材含量6.60g·100mL-1，加3倍量（体积）乙酸乙酯，萃取2次，萃取液蒸干，真空干燥。分别制备了多批龙胆对照提取物、坚龙胆对照提取物。 采用HPLC法，测定了对照提取物中龙胆苦苷的含量。龙胆对照提取物、坚龙胆对照提取物中龙胆苦苷的平均质量分数分别为31.37％，25.20％。分别建立了龙胆对照提取物、坚龙胆对照提取物指纹图谱。龙胆对照提取物指纹图谱整体相似度大于0.99，坚龙胆对照提取物指纹图谱整体相似度大于0.98。在龙胆对照提取物指纹图谱的基础上，建立了具有5个特征峰的龙胆对照提取物特征图谱。在坚龙胆对照提取物指纹图谱的基础上，建立了具有5个特征峰的坚龙胆对照提取物特征图谱。特征图谱和龙胆苦苷的含量测定可用于龙胆/坚龙胆对照提取物的质量控制。 探究了龙胆/坚龙胆对照提取物在龙胆药材、饮片及含龙胆中药复方制剂龙胆泻肝丸、黄连羊肝丸、茵胆平肝胶囊中的应用。结果显示:龙胆对照提取物可用于龙胆药材、饮片的鉴别;而龙胆泻肝丸、黄连羊肝丸、茵胆平肝胶囊成分复杂，龙胆/坚龙胆对照提取物无法准确鉴别其中所含的龙胆药材。 三、不同厂家龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、栀子苷、黄芩苷体外溶出度的比较 中药复方制剂组方复杂，不同厂家样品的药材、辅料、制备工艺差异较大，采用同一色谱条件对不同来源、不同处方的复方制剂很难同时进行有效分离。研究表明，龙胆对照提取物无法同时达到鉴别龙胆泻肝丸、黄连羊肝丸、茵胆平肝胶囊中龙胆药材的目的。那么，不同生产厂家的中药复方制剂是否能够达到相同的临床疗效呢？本章以龙胆泻肝丸为研究对象，对其中主要有效成分龙胆苦苷、栀子苷、黄芩苷进行溶出度比较，探究不同厂家生产的龙胆泻肝丸中有效成分的溶出是否存在差异。 收集了市面上7个厂家的8批龙胆泻肝丸样品，建立了龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、栀子苷、黄芩苷的溶出度检测方法，并考察了不同厂家龙胆泻肝丸的溶出度情况。采用HPLC法测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、栀子苷、黄芩苷的含量，以200mL0.1mol·L-1的盐酸为溶出介质进行溶出度试验，测定不同厂家所生产龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、栀子苷、黄芩苷的体外溶出度，绘制累积溶出曲线。 分别采用零级动力学模型、一级动力学模型、Higuchi模型、Weibull模型对溶出数据进行模型拟合;采用相似因子f2法对累积溶出度进行比较;采用方差分析对溶出参数Td、T50进行两两比较。结果显示:以0.1 mol·L-1盐酸为溶出介质，不同厂家生产的龙胆泻肝丸溶出度存在差异;龙胆苦苷、栀子苷、黄芩苷三种成分的溶出行为差异较大。建议龙胆泻肝丸质量标准增加溶出度检测项目。