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目的:肠道菌群介导代谢、免疫、感染等多个方面,与人体健康密切相关。肾移植过程中各类药物使用和多个系统状态改变势必对肠道菌群造成影响,从而可能导致相关疾病风险增加。本研究通过观察肾移植患者手术前后肠道菌群状态改变,探索肾移植对患者肠道菌群的影响以及可能带来的风险。方法:第一部分:收集2015年9月至10月在解放军309医院行亲属肾移植的受者(7名)术前3天和术后第28天的粪便样本,采用前后自身对照的设计方案,基于16s rDNA高通量基因测序技术和silva数据库对比分析肠道菌群结构差异和丰度的变化,利用mothur、graphpad、R语言、Lef SE等软件进行肠道菌群多样性和差异性分析。第二部分:进一步对服用磺胺类药物的患者进行菌群结构的分析。收集2016年6月至8月在我院行亲属肾移植的受者(10名)的粪便样本,实验方法同上,比较两种不同状态对肠道菌群的影响。结果:1、第一部分实验中14例样本共获得有效序列429535条,第二部分共20例样本共获得有效序列737730条,序列有效长度均在420-460bp,测序覆盖率好,在97%的相似水平下分别共获得276类和449类OUT。两部分实验所构建的稀释曲线和香农曲线中所有样本基本均随着测序深度的增加趋向平坦,测序数据量足够。2、利用所测OTU、Ace、Chao、Shannon、Simpson等指数对肠到菌群的α多样性进行评估发现,第一部分实验中的指标提示相较于术前,术后肠道菌群多样性呈下降趋势但无统计学差异,而第二部分实验中术后肠道菌群多样性显著下降,统计学差异明显。3、利用主坐标分析(PCo A)和相似度树状图对肠道菌群的β多样性进行评估,PCo A显示第一部分实验中手术前后两组样本存在部分相互混杂,不能区分。而第二部分实验中手术前后两组样本少部分样品重叠,但是分布可明显区分开。相似度树状图结果类似,两部分实验中两组样品总体趋势为均在本组中实现聚类,再进一步与其他合并,但是第二部分实验区分更为明显。4、两部分实验均呈现术后肠道菌群厚壁菌门相对丰度下降和变形菌门丰度上升的趋势,均出现不同程度的肠道菌群紊乱,但在第二部分实验中程度更深。Lef SE分析用于比较组间肠道菌群差异性,第一部分实验手术前后纲、目、科、属水平均有差异,相对丰度下降的绝大部分属于厚壁菌门内毛螺旋菌科和胃瘤球菌科,相对丰度上升的仅有奇异菌属。第二部分实验,除了纲、目、科、属水平差异,变形菌门相对丰度显著上升,进一步细化发现,除了厚壁菌门内的毛螺旋菌科和胃瘤球菌科内细菌相对丰度进一步丢失,其他菌门内部分细菌同样受到影响,术后埃希氏菌属、肠球菌属成为绝对优势菌。结论:1、16S rDNA基因序列分析技术能够测序肠道中所有微生物DNA序列,全面分析肠道微生物落的多样性和丰度,满足对肾移植患者肠道微生物群落的全面认识。2、肾移植会损伤患者肠道菌群多样性,长期服用磺胺类药物会导致多样性进一步丢失。3、肾移植术后肠道内优势共生菌群减少,机会致病菌增多,在服用磺胺类药物的病人中更加明显。这种改变可能导致肠道代谢产物的改变并且在肠粘膜屏障受损基础上诱发细菌易位和免疫紊乱导致感染甚至排斥反应的发生,但仍待进一步实验验证。