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第一部分甲状腺肿瘤中P14ARF和FHIT蛋白表达的研究。
[目的]：INK4a/ARF(alternativereadingframe)基因在人类多种肿瘤中失活，其位于人染色体9p21，编码两种功能不相关的蛋白，即p16INK4a和p14ARF。两种mRNA的差别仅在于其编码区第1外显子不同，p16INK4a为E1α，p14ARF为E1β，而E2和E3则完全相同。由于p14ARF和p16INK4a有两套各自独立的启动子，可读不同的编码框，因此它们编码的蛋白没有氨基酸序列的同源性。P14ARF蛋白能将细胞周期阻断在G1期和G2期。P14ARF能在核质中捕获MDM2(mousedoubleminute2)，阻止MDM2的转运作用，使P53在细胞核中积累，在DNA损伤时，P53可诱导凋亡。
脆性组氨酸三联体基因(fragilehistidinetriadgene，FHIT)定位于染色体3p14.2，含脆性位点(FRA3B)，cDNA长1.1Kb，其编码的蛋白为腺嘌呤三磷酸非对称性水解酶，具有抑癌活性，一方面可以促进微管的装配，另一方面，抑制细胞周期，促进细胞凋亡，抑制肿瘤生长。
P14ARF及FHIT蛋白为重要的肿瘤抑制蛋白，与多种肿瘤的发生发展有关，但其在甲状腺肿瘤中作用的报道较少。通过检测P14ARF及FHIT蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达，分析其与甲状腺肿瘤发生发展的关系，并以期寻找鉴别甲状腺腺瘤和滤泡癌的新的辅助指标，为临床病理诊断提供实验依据。
[方法]：采用免疫组化S-P法检测20例甲状腺腺瘤和28例甲状腺癌组织中P14ARF及FHIT蛋白的表达，其中28例甲状腺癌包括11例甲状腺滤泡癌(FTC)、12例乳头状癌(PTC)、4例髓样癌(MTC)以及1例未分化癌(UDTC)。
[结论]：肿瘤抑制蛋白P14ARF和FHIT的缺失是甲状腺肿瘤发生的重要原因之一；联合检测P14ARF及FHIT蛋白可能有助于区分甲状腺腺瘤和甲状腺滤泡癌。
第二部分甲状腺肿瘤中P14ARF及FHIT基因的纯合性缺失及甲基化
[目的]：INK4a/ARF基因座位于人染色体9p21，可转录生成两种不同的mRNA，其中之一编码ARF蛋白(人来源称为p14ARF，鼠来源称为p19ARF)。p14ARF基因由3个外显子和2个内含子组成，3个外显子为E1β、E2和E3，E1β长约268bp。p14ARF基因启动子含CpG岛。
FHIT基因定位于染色体3p14.2，其编码的FHIT蛋白具有抑癌活性，一方面可以促进微管的装配，另一方面，抑制细胞周期，促进细胞凋亡，抑制肿瘤生长。
p14ARF与FHIT基因的纯合性缺失及DNA启动子过度甲基化导致的蛋白失活与多种肿瘤的发生有关，如胃癌、白血病等，但是否在甲状腺肿瘤发生中发挥作用，目前少有报道。本实验通过检测甲状腺肿瘤中p14ARF与FHIT基因的纯合性缺失及甲基化，探讨其与甲状腺肿瘤发生发展的关系及意义，以期寻找鉴别甲状腺腺瘤和滤泡癌的新的辅助指标，为临床病理诊断提供实验依据。
[方法]：采用PCR、MS-PCR方法，分别检测20例甲状腺腺瘤和28例甲状腺癌组织中p14ARF与FHIT基因的纯合性缺失及甲基化。其中28例甲状腺癌包括11例甲状腺滤泡癌(FTC)、12例乳头状癌(PTC)、4例髓样癌(MTC)以及1例未分化癌(UDTC)。
[结论]：p14ARF与FHIT基因的变异与甲状腺肿瘤的恶性进程有关；检测p14ARF与FHIT的基因变异有助于鉴别甲状腺腺瘤和滤泡癌。