【摘 要】
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蛋白质在食品、医药及生物等领域都存在着重要的作用和广泛的应用,因此高效和高灵敏度的蛋白质检测已成为现代药物分析、分析化学及生命科学研究的热点。金属硫蛋白(Metallot
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蛋白质在食品、医药及生物等领域都存在着重要的作用和广泛的应用,因此高效和高灵敏度的蛋白质检测已成为现代药物分析、分析化学及生命科学研究的热点。金属硫蛋白(Metallothionein,MT),具有重金属解毒、参与必需金属元素的储存、运输和代谢、清除自由基等多种生物功能。虽然迄今已拥有几种检测方法,但到目前为止,还没有统一、标准的检测手段。因此建立对金属硫蛋白进行快速、灵敏的检测方法有助于进一步深入研究和探讨其生物学功能。本文从检测金属硫蛋白的水解产物——半胱氨酸出发,建立了高效液相色谱法测定半胱氨酸含量,从而达到测定金属硫蛋白含量的目的。首先通过确定半胱氨酸的最佳溶解条件、标准曲线、最低检出限、精密度及衍生后的保留时间等,从而对金属硫蛋白进行定性研究。然后又通过测定样品加标后的回收率从而对金属硫蛋白进行定量研究。同时使用氨基酸分析仪,且采用相同的实验方法,证明了高效液相色谱法检测金属硫蛋白的可行性和实验结果的准确性。实验结果表明,高效液相色谱法检测金属硫蛋白的水解产物——半胱氨酸,具有灵敏度高、回收率高的优点,适合于常规实验室操作,为建立统一、标准的检测方法奠定了基础。
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