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背景和目的：大疱性类天疱疮(Bullous Pemphigoid, BP)是临床上较常见一种自身免疫性表皮下大疱病,该病好发于中老年人,患者大面积水疱、明显瘙痒、糜烂渗出、继发感染,严重影响生活质量。近年来研究发现Th17细胞在许多自身免疫性疾病中发挥着重要的作用。而BP亦为一种自身免疫性疾病,它与Th17细胞及其细胞因子IL-17之间的关系,目前国内外研究较少。另外,在BP患者组织病理可见水疱及真皮乳头有多数嗜酸性粒细胞(EOS)浸润、有的还可见到中性粒细胞、淋巴细胞。有研究报道EOS及Eotaxin-2与BP的发展变化均有着密切联系,但哪一指标在疾病早期活动有更显著的血清学变化,目前还没有明确结论。本研究分别通过检测Th17细胞、IL-17及EOS、Eotaxin-2在BP治疗前后的变化,来探讨它们在BP发病机制中的作用及与疾病活动性之间的关系。(一)大疱性类天疱疮患者外周血中Th17及IL-17表达水平的研究方法：：分别收集27例BP患者在治疗前、后及27例健康对照组的外周静脉血。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,检测BP患者血清中IL-17的浓度；同时采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测外周血单个核细胞(PBMC)中细胞因子IL-17 mRNA的表达水平；并用流式细胞术(FCM)检测外周血中Th17细胞占CD4+T细胞的百分比。结果：1、BP患者外周血中IL-17及IL-17mRNA的表达水平： (1)血清中IL-17的表达：实验组治疗前血清中几-17的水平为32.34±9.55 ng/L,治疗后血清中IL-17水平为17.47±3.01 ng/L,而对照组血清中IL-17表达水平为14.74±2.77 ng/L。实验组治疗前IL-17水平显著高于治疗后及对照组,差异有统计学意义,(P分别<0.01、<0.05)；治疗后较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。(2) PBMC中IL-17 mRNA的表达：实验组治疗前外周血单个核细胞IL-17 mRNA的相对表达水平是治疗后的2.475倍(P<0.05),是对照组的2.980倍(Il<0.05),差异有统计学意义；而治疗后的表达水平与对照组相近(1.204倍),差异无统计学意义(P>0.05)。2、BP患者外周血中Th17细胞占CD4+T细胞的百分比：实验组治疗前外周血中Thl7占CD4+T细胞的百分比为3.280%±0.197%,明显高于对照组(0.675%±0.019%),差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后Th17的百分比为0.807%±0.118%,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：Th17细胞及其细胞因子IL-17可能参与BP的发病机制,并发挥着重要作用。(二)大疱性类天疱疮患者外周血中Eotaxin-2的研究方法：分别收集32例BP患者(28例初发病例和4例复发病例)在治疗前、后及32例健康对照组的外周静脉血。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,检测BP患者血清中Eotaixn-2的浓度；同时采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测外周血单个核细胞(PBMC)中细胞因子Eotaixn-2 mRNA的表达水平。分别记录32例BP患者在治疗前、后血常规检查中嗜酸性粒细胞绝对值的变化,分析BP患者治疗前、后外周血中EOS与Eotaxion-2的变化,比较两者对BP活动的敏感性。结果：1、BP患者外周血中Eotaxin-2及Eotaxin-2 mRNA的表达水平： (1)血清中Eotaxin-2的表达：实验组治疗前血清中Eotaxin-2的水平为225.77±36.12 ng/L,治疗后为104.76±18.68 ng/L,而对照组为94.55±20.27ng/L。实验组治疗前Eotaxin-2的水平显著高于治疗后及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。(2) PBMC中Eotaxin-2 mRNA的表达：实验组治疗前外周血单个核细胞Eotaxin-2 mRNA的相对表达水平是治疗后的4.324倍,是对照组的4.436倍,差异有统计学意义(P<0.05)；而治疗后的表达水平与对照组相近(1.026倍),差异无统计学意义(P>0.05)。2、BP患者在治疗前后外周血中EOS与Eotaxin-2的变化的关系：32例BP患者中,只有6例初发患者EOS计数升高,4例复发患者EOS计数无升高,而25例初发患者及4例复发患者治疗前血清中Eotaxin-2的表达水平都有显著升高。且初发和复发病例治疗前血清中Eotaixn-2的表达水平比较(223.58±29.14 ng/L vs.226.43±35.47ng/L),差异无统计学意义(P>0.05),所有BP患者治疗后外周血中EOS及Eotaxin-2的表达水平均降至正常水平。结论：在BP的发病中,Eotacxin-2可能是较EOS为更敏感的指标。