【摘 要】
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该研究根据牛SRY基因5调控区序列设计合成了2对嵌套式PCR引物作为公牛特异的性别鉴定引物,根据牛酪蛋白基因序列设计合成了一对引物作为内标基因引物建立了牛胚胎性别鉴定的P
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该研究根据牛SRY基因5调控区序列设计合成了2对嵌套式PCR引物作为公牛特异的性别鉴定引物,根据牛酪蛋白基因序列设计合成了一对引物作为内标基因引物建立了牛胚胎性别鉴定的PCR反应体系.并用所设计引物对人、牛和其他哺乳动物的DNA进行扩增,以检测引物的特异性.同时对微量胚胎细胞DNA的提取方法和实验过程中可能对鉴定结果产生污染的各种因素进行了研究.利用颗粒细胞在高倍体视显微镜下可以确定所取细胞个数的特点,使用相同数量的细胞对常规多重PCR和巢式PCR的灵敏度进行了比较.在建立和优化了牛胚胎性别鉴定的PCR体系后该实验对黑白花奶牛进行了超数排卵处理,胚胎回收后选择了10个A、B级胚胎采用NARISHIGE简易胚胎分割仪进行分割取样,提取了胚胎细胞DNA后,用巢式PCR鉴定了胚胎的性别.该实验还对胚胎操作时所用的犊牛血清是否会对实验结果产生污染进行了研究,结果表明本实验所用的血清纯度较高不会对实验产生污染.该研究所使用的胚胎性别鉴定技术完全可以在实际生产中推广应用.
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