【摘 要】
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该文利用农产品生产中普遍应用的有机磷和氨基甲酸酯类农药能够抑制胆碱酯酶活力的毒理机制,针对农产品农药残留酶抑制快速检测所使用的胆碱酯酶尚无标准的制剂,且不同来源的
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该文利用农产品生产中普遍应用的有机磷和氨基甲酸酯类农药能够抑制胆碱酯酶活力的毒理机制,针对农产品农药残留酶抑制快速检测所使用的胆碱酯酶尚无标准的制剂,且不同来源的酶制剂酶活力差别大,影响检测效果的问题,以不同来源的动物酯酶和植物酯酶为试材,通过对胆碱酯酶的活性和耐藏性的比较及其它特性的综合分析,以筛选出来源充足、酶活高、耐保藏的酶源;通过对胆碱酯酶的提取、纯化和保存方法的筛选研究,确定胆碱酯酶制剂的最佳制备方法;通过对提取出的酶的保藏温度、防腐剂种类及其浓度以及大孔径阴离子交换树脂固定化处理方法的研究,筛选出适宜的酶保藏方法.应用该试验所制备的胆碱酯酶制剂检测蔬菜中农药残留情况,结果表明,由马血清和辽春10号小麦提取纯化的胆碱酯酶制剂均可用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速测定,检测限在0.1~0.5mg/kg之间,可以满足一般检测要求;试验中通过正交试验对制备的两种酶制剂适宜的测定条件进行了初步的优化,结果为,植物酯酶检测系统:底物(α-乙酸萘酯)0.6ml,呈色剂(固蓝B盐)0.06ml,酶液1ml,反应温度40℃,抑制时间10min;动物酯酶检测系统:底物(碘化硫代乙酰胆碱)0.05ml,呈色剂(5,5-二硫代-2,2-二硝基苯甲酸)0.05ml,酶液0.05ml,反应温度40℃,抑制时间30min.
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