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开花是高等植物从营养生长向生殖生长转变的重要生理过程。FT基因在拟南芥的开花整合途径中是一个非常重要的开花整合因子,FT蛋白作为植物开花素在植物成花诱导中具有重要作用。本论文通过农杆菌介导转化的方法使金钗石斛FT基因家族中三个成员DnFT、DnMFT、DnFTL在拟南芥中异源超表达,对其功能进行初步的研究,获得以下主要结果:
1.DnFT在野生型拟南芥Col中异源超表达后可以强烈促进拟南芥提前开花,并可以促进拟南芥中FT下游基因AP1和LFY的表达。35S∷DnFT-3、35S∷DnFT-10和35S∷DnFT-24的开花时间分别是14 d、17 d和13 d,比Col分别提前12 d、9 d和13 d开花;开花时莲座叶数分别是5片、7片和5片,比Col少5-6片真叶。DnFT在拟南芥ft-10突变体中异源超表达之后不能恢复厂ft-10突变体的晚花表型。因此认为DnFT基因不能完全取代FT基因在拟南芥中的开花促进因子的功能。
2.DnMFT在野生型拟南芥Col中异源超表达后,不影响拟南芥根的生长,但是转基因拟南芥却出现植株和叶片较小的表型,DnMFT的超表达还抑制了拟南芥中FT下游基因AP1的表达从而使转基因植株出现了晚花表型。35S∷DnMFT-3、35S∷DnMFT-8与野生型拟南芥Col相比植株和叶片面积较小;35S∷DnMFT-2、35S∷DnMFT-3和35S∷DnMFT-8的开花时间分别是28 d、30 d和28 d,比Col晚2~4 d开花,开花时其莲座叶数与野生型拟南芥Col相比无明显差异。因此认为DnMFT有可能是一个开花抑制因子。
3.DnFTL在野生型拟南芥Col中异源超表达后,5 d时6个转基因株系35S∷DnFTL-3、35S∷DnFTL-4、35S∷DnFTL-5、35S∷DnFTL-9、35S∷DnFTL-10和35S∷DnFTL-12与Col相比主根较短,但是根长差异的表型在13 d时消失。开花时间和开花莲座叶数与Col相比无显著性差异。因此认为DnFTL抑制了根的早期生长,不影响拟南芥开花。