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磺胺二甲基嘧啶作为一种人工合成的广谱抗菌药，主要用于治疗细菌感染性疾病，并作为饲料添加剂在畜禽动物性食品的生产中被广泛应用，但是过量使用会导致在食用动物性产品中残留，给人类健康带来潜在威胁。目前国内针对磺胺二甲基嘧啶残留的免疫检测方法主要为酶联免疫吸附法(ELISA)，但是所用的检测试剂盒多为进口产品，成本较高，因此本研究旨在建立一种快速、准确的磺胺二甲基嘧啶免疫检测方法。
本研究采用重氮耦合法制备磺胺二甲基嘧啶(SM<,2>)与鸡卵清蛋白(OVA)的偶联物(SM<,2>-OVA)并以其作为包被抗原对5株抗SM<,2>的单克隆抗体进行ELISA测定，然后以特异性反应强的4D5a作为竞争反应抗体，建立了检测磺胺二甲基嘧啶残留的直接竞争法ELISA，并对该方法的灵敏度、特异性、准确性、重复性进行了测定。结果表明，此方法的灵敏度为5.82ng/mL，低于国家以及国际规定的磺胺二甲基嘧啶最高残留量标准25ng/mL，当样品浓度在10ng/mL～500ng/mL范围内时可以得到比较可靠的检测结果。与磺胺甲氧嗪(SMP)的交叉反应率为2.62％，与磺胺嘧啶(SD)的交叉反应率为4.11％，与磺胺吡啶(SP)的交叉反应率为0.67％，与磺胺二甲氧嘧啶(SDM)的交叉反应率为1.74％，与磺胺甲基嘧啶(SM)的为交叉反应率12.92％。牛奶添加标准品回收率平均值为131.06％，猪肉添加标准品回收率平均值为122.36％。批内检测变异系数在4.00％-11.24％范围内，批间检测变异系数在4.37％-7.23％范围内。经用该法检测灌胃SM<,2>小鼠的血清样品，结果符合SM<,2>预期残留浓度；与R-Biopharm公司的 RIDASCREEN Sulfamethazin ELISA kit对比测定显示两者基本相当。