表面增强拉曼免疫分析在肿瘤病理及实验室诊断应用的研究

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SERS标记免疫检测技术是利用SERS的高灵敏度和光谱选择性,结合抗原抗体特异性相互作用而发展起来的一种新的标记免疫检测技术。本文从三个方面对SERS标记免疫检测进行了系列的研究。第一部分,探讨SERS免疫分析方法的灵敏度和特异性。以金银核壳纳米粒子为基底,4-MBA为标记分子,制备LMP1-SERS探针,并结合SERS成像技术,分析34例鼻咽癌和20例正常鼻咽组织中LMP1的表达。将SERS免疫分析的结果与常规的免疫组织组化的结果进行比较,发现SERS免疫检测的阳性率(97.1%)优于免疫组化(64.7%),接近EBER-ISH的方法(100%),表明这种新的SERS免疫分析方法具有较高的灵敏度和特异性。第二部分,探讨SERS免疫分析法应用于分析血液中的肿瘤标志物的潜在应用价值。以金核银壳纳米颗粒为增强基底,4-MBA为标记分子,采用三明治夹心SERS免疫法检测不同浓度的CEA蛋白,并建立校正曲线。利用该曲线定量检测结肠癌患者的血清CEA的浓度,检测结果与电化学发光法非常接近,且检测的最小值为5pg/ml。第三部分,探讨SERS标记免疫检测技术用于组织切片多组分检测的可行性。采用银纳米粒子作为增强基底,分别以4-MBA和结晶紫CV作为标记分子,成功地实现了在结肠癌组织中CEA和vimentin以及正常鼻咽组织CK和vimemtin的双组分免疫检测。从SERS成像图,可以直观、准确地观察相应蛋白质的表达及空间分布的情况。这为SERS标记免疫多组分检测技术应用于临床提供重要的理论依据。综上所述,SERS免疫检测具有操作简便快速,敏感性高等优点,可实现组织的单组分和双组分免疫检测及血液中的肿瘤标志物的微阵列分析等。本研究为SERS技术进入常规肿瘤病理和实验室诊断进行了有益的探索,为SERS的临床应用奠定了基础。
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