苦参碱对BCG加LPS诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤的保护作用

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苦参碱是豆科植物苦豆子S.alopecuroides L,苦参Sophora flavescens Ait,广豆根S. subprostrata Chun et T. Chen等中草药的活性成分,具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、抗心律失常、降血脂、平喘等多种药理作用,因此可作为药用植物资源进行开发和利用。由于苦参碱抗炎作用的机制尚未完全阐明,为此,本课题以小鼠免疫性肝损伤为模型,研究苦参碱对BCG加LPS诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤的保护作用及其作用机制。第一部分苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能及免疫器官的影响目的观察苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能、免疫器官系数的影响。方法BALB/c雄性小鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组,模型组,联苯双酯组,苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型,正常对照组与模型组给予生理盐水,阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯,药物处理组分别给予20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg苦参碱。除正常对照组外,其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗,第2天起,各给药组以0.1ml/10g灌胃给药,每天1次,连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击,禁食12h。分别观察不同剂量的苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠免疫器官系数的影响。结果模型组小鼠ALT、AST及免疫器官系数明显升高,与正常对照组相比,差异均具有统计学意义;与模型组相比,苦参碱能够显著降低免疫性肝损伤小鼠ALT、AST及免疫器官系数。结论苦参碱可降低BCG加LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠的ALT、AST及免疫器官系数。第二部分苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠抗氧化能力的影响目的探讨苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量的影响。方法BALB/c雄性小鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组,模型组,联苯双酯组,苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型,正常对照组与模型组给予生理盐水,阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯,药物处理组分别给予20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg苦参碱。除正常对照组外,其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗,第2天起,各给药组以0.1ml/10g灌胃给药,每天1次,连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击,禁食12h。摘取小鼠肝脏,制成10%的肝匀浆,用GSH-Px、T-AOC、MDA检测试剂盒分别检测小鼠肝匀浆中GSH-Px活性、T-AOC及MDA含量。结果模型组小鼠肝匀浆中MDA含量升高,GSH-Px活性和T-AOC含量降低,与正常对照组相比,差异均具有统计学意义;与模型组相比,苦参碱能够降低BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中MDA含量,提高GSH-Px活性和T-AOC含量。结论苦参碱的抗炎作用与其提高小鼠体内抗氧化物质的活力有关。第三部分苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中炎症介质的影响目的观察苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中炎症介质肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1β)、一氧化氮(NO)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)含量的影响。方法BALB/c雄性小鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组,模型组,联苯双酯组,苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型,正常对照组与模型组给予生理盐水,阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯,药物处理组分别给予20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg苦参碱。除正常对照组外,其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗,第2天起,各给药组以0.1ml/10g灌胃给药,每天1次,连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击,禁食12h。摘取小鼠肝脏,制成10%的肝匀浆,用放射免疫方法检测小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β的含量;用NO、iNOS检测试剂盒检测小鼠肝匀浆中NO、iNOS含量。结果模型组小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β、NO、iNOS含量升高,与正常对照组相比,差异均具有统计学意义;与模型组相比,苦参碱能够降低免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β、NO、iNOS含量。结论苦参碱的抗炎作用可能与下调致炎因子(TNF-α、IL-1β、NO、iNOS),抑制致炎效应有关。
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