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目的：本研究旨在探索低剪切应力诱导内皮细胞Fractalkine(FKN)基因、蛋白表达与作用时间的联系，并初步探索ERK1/2信号转导途径对低剪切应力诱导FKN表达上调的影响，为低剪切应力通过何种信号转导途径的研究奠定基础，为防治冠状动脉粥样硬化性心脏病为代表的心脑血管疾病提供线索。 方法：1.用M199生长液(含1％青链霉素合剂的M199培养基，10%的胎牛血清)培养EA.HY926细胞株。观察光学显微镜及电子显微镜下形态，通过Ⅷ因子相关抗原免疫组化、细胞纯度检测CD31抗体表达及细胞的增长曲线鉴定EA.HY926细胞株。2.选择剪切应力强度4.58 dyne/cm2不同时间（对照组，0.5，1，2，3，5，7，9，11h）分组处理EA.HY926细胞株。采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中FKN mRNA的表达，双抗体夹心酶联免疫法检测灌流液中FKN的浓度。3.通过Western blot、细胞免疫荧光技术探索低剪切应力对ERK1/2的激活。4.采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中FKN mRNA的表达研究ERK1/2阻断剂对低剪切应力诱导的EA.HY926人脐静脉内皮细胞株FKNmRNA表达的影响。 结果：1.⑴光学显微镜下形态观察：EA.HY926细胞株生长2～3d可铺满单层，细胞呈梭形，漩涡状排列生长，传代后可见管腔样结构，可长成复层。⑵透射电镜下形态观察：发现横切与纵切的Webel-Palade小体。⑶免疫组化结果观察细胞质表现为棕黄色颗粒。⑷EA.HY926细胞株生长曲线稳定，适用于细胞实验。2.4.58 dyn/cm2剪切应力下处理不同时间，1h组FKNmRNA表达水平最高。0.5h、1h与无处理组、7h、9h、11h组比较差异有统计学意义，其余各组之间差异不明显。2h组灌流液蛋白表达水平最高。1h，2h，3h与无处理组、7h、9h、11h组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。其余各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。3.低剪切应力（4.58 dyne/cm2）作用于EA.HY926人脐静脉内皮细胞株后在观察时间内可引起ERK1/2蛋白磷酸化水平的升高，出现明显的蛋白条带。根据Quality One图像分析系统测定分析得出随时间增加ERK1/2磷酸化增强，10min时达到高峰，随刺激时间延长而逐渐降低，1h低至0min水平以下，而总ERK1/2在各时间段的表达无明显差异。内参GAPDH的表达亦无明显差异。细胞免疫荧光显示未行剪切应力处理时磷酸化的ERK1/2蛋白表达相对较低，低剪切应力处理10min后，染色明显，满视野分布绿色荧光区域，低剪切应力作用30min后荧光又趋于变淡。4.低剪切应力可上调EA.HY926细胞株FKN基因的表达，与未行任何处理的EA.HY926细胞株比较，有明显统计学差异，ERK1/2信号转导途径阻断剂PD98059可抑制低剪切应力诱导的EA.HY926细胞株FKN基因的上调。DMSO组与低剪切应力处理组比较，无明显差别。 结论：此结果提示剪切应力诱导FKN表达随处理时间延长逐渐上调，到达峰值后逐渐下降上调，具有早期预见性，可能在炎症和动脉粥样硬化的发生、发展过程中具有早期预警的重要作用。低剪切应力可激活ERK1/2信号转导通路，并且双向，快速。ERK1/2信号转导途径特异性抑制剂能够下调低剪切应力诱导内皮细胞FKN mRNA的表达，为FKN靶点治疗奠定了基础。