槐耳清膏体外逆转人肝癌细胞HepG2/ADM多药耐药性

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目的探讨槐耳清膏能否体外逆转人肝癌细胞HepG2/ADM多药耐药性的作用及可能的作用机制。方法MTT法检测槐耳清膏的细胞毒作用,比较槐耳清膏处理前后耐药细胞HepG2、HepG2/ADM对化疗药物的敏感性;流式细胞仪检测槐耳清膏处理前后HepG2、HepG2/ADM细胞内的阿霉素累积浓度;RT-RCR检测槐耳清膏处理前后HepG2、HepG2/ADM细胞MDR1基因的表达情况。结果槐耳清膏在0.008g/L时对HepG2和HepG2/ADM细胞无明显毒性,超过此浓度呈剂量效应关系,槐耳清膏对HepG2,HepG2/ADM的IC50分别为0.917g/L和1.66g/L,联合使用0.008g/L浓度槐耳清膏后HepG2细胞和HepG2/ADM细胞对ADM、DDP、MMC和5-FU的IC50明显降低,HepG2/ADM细胞在槐耳清膏作用前后对上述四种化疗药物的IC50分别为0.913±0.063、0.895±0.096、0.26±0.015、1.169±0.039 mg/L和0.247±0.026、0.352±0.016、0.109±0.013、0.412±0.021 mg/L。联合使用槐耳清膏后HepG2/ADM上述四种化疗药物耐药性的逆转倍数分别为3.4倍、2.54倍、2.39倍、2.84倍,相对逆转效率分别达到79%、73.5%倍、97.4%倍、86.7%。槐耳清膏能够提高HepG2,HepG2/ADM细胞内药物浓度。实验组ADM与无细胞毒性的槐耳清膏合用,与对照组单独使用ADM比较,细胞内ADM的累积量明显提高(P<0.05)。槐耳清膏能够降低HepG2/ADM细胞MDR1表达。RT-PCR结果显示HepG2细胞的MDR1表达明显弱于HepG2/ADM细胞,且槐耳清膏作用后无显著变化;而HepG2/ADM经0.008g/L槐耳清膏作用48h后,MDR1的表达下降了33.7%,但仍高于HepG2细胞。结论槐耳清膏在体外表现出较强的逆转人肝癌细胞多药耐药性作用,其作用机制可能与下调MDR1表达、抑制细胞膜表面P-gp的功能从而增加细胞内药物积累有关。为临床肝癌的联合化疗,提高化疗的敏感性提供了一定的理论依据。
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